_ Oamenii de știință dezvoltă un nou mod de lanț de hibridizare liniară reacție

Reacția în lanț de hibridizare se referă la o reacție de polimerizare a acidului nucleic fără enzime. O moleculă țintă declanșează reacții de hibridizare în cascadă prin mai multe fire de combustibil ADN stabile din punct de vedere termodinamic, producând nanostructuri de ADN ultra-lungi cu spărturi. Amplificarea semnalului moleculei țintă poate fi realizată prin aplicarea unei reacții în lanț de hibridizare.

Oamenii de știință de la Institutul de Inginerie și Tehnologie Biomedicală Suzhou (SIBET) al Academiei Chineze de Științe au dezvoltat un nou tip de reacție în lanț de hibridizare liniară care cuplează nanoparticulele magnetice și nanoparticulele de argint pentru analiza extrem de sensibilă și selectivă a acizilor nucleici țintă.

Nanoparticulele de Fe3O4 au fost mai întâi pregătite pentru separarea magnetică rapidă și nanoparticulele de aur s-au format la suprafață pentru imobilizarea fire de ADN. „Datorită zonei specifice uriașe, un număr mare de sonde A ADN pot fi imobilizate”, a spus Miao Peng, cercetător principal al studiului la SIBET.

Această sondă conține patru regiuni funcționale, dintre care două sunt complementar miARN-ului țintă.

După introducerea DSN, duplexurile ADN/ARN s-au format, iar reacțiile de digestie au eliberat catene țintă de miARN pentru reacții reciclate și au creat Sondele B și C monocatenar pentru a acționa în continuare asupra structura prismei triunghiulare ADN la suprafața electrodului.

Pe de altă parte, ADN-ul 3D structurat cu prismă triunghiulară (TPDNA) a fost asamblat la suprafața electrodului ca strat de recunoaștere. TPDNA a arătat o structură geometrică rigidă, care oferă locuri adecvate pentru captarea sondelor B și C.

Firmele localizate oferă două regiuni monocatenare, care au fost folosite pentru a captura firele de combustibil ale H1, H2, H3 și H4. . S-a format o structură lungă de ADN asemănătoare unei scări care posedă mai multe grupări amino pentru imobilizarea nanoparticulelor de argint ca sonde electrochimice puternice.

După măsurarea intensității vârfului de stripare a argintului, nivelul inițial de miARN țintă poate fi evaluat. Nanomaterialele implicate în această lucrare au fost pe deplin caracterizate, iar reacțiile corespunzătoare au fost verificate prin electroforeză pe gel de poliacrilamidă și tehnici electrochimice. În condiții experimentale optimizate, limita de detecție de 5×10-18 mol/L poate fi atinsă cu o bună selectivitate a secvenței.

Rezultate satisfăcătoare au fost obținute în testele clinice efective ale probelor, conform Miao.

Rezultatele studiului au fost publicate în Biosensors and Bioelectronics, intitulat „Ultrasitive miRNA biosensor amplified by ladder hybridization chain reaction on triangle prism structured DNA.”

(Fluierul)