23:59
Comentarii Adauga Comentariu

ACE Polimorfisme



Polimorfismele ACE

FA Sayed-Tabatabaei. BA Oostra. A. Isaacs. CM van Duijn, și JCM WittemanDe la Departamentele de Epidemiologie și Biostatistică (FAS-T., AI, CMvD, JCMW) și Clinică de Genetică (BAO), Erasmus Medical Center, Rotterdam, Olanda.

Publicat inițial 12 mai 2006

https://doi.org/ 10.1161/01.RES.0000223145.74217.e7

Cercetarea circulației. 2006; 98: 1123-1133

Abstract

Enzima de conversie a angiotensinei (ACE) joacă un rol esențial în două sisteme fiziologice, unul care conduce la producerea de angiotensină II și celălalt la degradarea bradicininei. Distribuția largă și proprietățile multifuncționale ale acestor peptide sugerează că ACE ar putea fi implicată în diverse afecțiuni fiziopatologice. Descoperirea că nivelurile de ACE sunt sub control genetic au creat o nouă eră de investigare; majoritatea studiilor s-au concentrat pe un polimorfism de inserție / ștergere (I / D) în intron 16 al genei-ACE ca marker pentru un polimorfism funcțional. Recent, multe polimorfisme cu un singur nucleotid au fost detectate în genă și căutarea locațiilor polimorfismelor funcționale a devenit un subiect de investigare extinsă. Cu toate acestea, studiile de asociere privind polimorfismul I / D și rezultatele clinice au continuat, în mare parte cu rezultate contradictorii. Acest articol examinează starea actuală de cunoștințe cu privire la polimorfismele ACE și sugerează că un polimorfism funcțional este cel mai probabil situat între intron 18 și 3 'UTR. Cu toate acestea, nu poate fi exclusă existența potențială a unui alt polimorfism funcțional în UTR de 5 ′. Această revizuire prezintă, de asemenea, o imagine de ansamblu a funcției ACE în diferite sisteme fiziopatologice și rezumă rapoartele anterioare despre ACEși rezultatele clinice. Deși constatările privind polimorfismul I / D și tulburări precum nefropatia diabetică și boala Alzheimer pot fi considerate concludente, rapoartele despre majoritatea fenotipurilor cardiovasculare sunt încă controversate. Clasificările genotipice și fenotipice, puterea insuficientă în unele studii și prezența interacțiunii cu alte gene sau factori de mediu sunt explicații posibile pentru descoperirile contradictorii.

Proteina ACE

Enzima care transformă angiotensina (ACE) este o metalopeptidază de zinc distribuită pe scară largă pe suprafața celulelor endoteliale și epiteliale. Mai multe denumiri diferite se referă la această enzimă în literatura științifică ( tabel ). ACE transformă decapeptidul inactiv, angiotensina I (Ang I sau Ang 1-10), în octapeptidă activă și vasoconstrictor puternic angiotensină II (Ang II sau Ang 1-8), care este principalul produs activ al sistemului renină-angiotensină ( RAS). 1 Reglarea pe termen lung a tensiunii arteriale și a volumului sanguin în organism este controlată de RAS. figura 1arată schematic relațiile dintre diferite proteine ​​din acest sistem hormonal. Renina este eliberată de celulele juxtaglomerulare în rinichi în condiții de sare, pierdere de volum sau activare simpatică. Scindează angiotensinogenul peptidic inactiv (sintetizat de ficat), producând angiotensină I, care este o proteină vasoinactivă. La rândul său, angiotensina I este transformată în angiotensină II prin acțiunea enzimei de conversie a angiotensinei ( figura 1 ).

Tabelul 1. Enzima de conversie a angiotensinei (ACE) și proteinele sale omologe din diferite specii

specie Desemnări pentru enzimă Alte aliasuri Cromosom (Locație)

Apis mellifera Similar cu ACE ... LG5

Bos taur Similar cu ACE ... Un Canis familiaris AS DCP1 9

Drosophila melanogaster CG8827-PA, izoforma A AS 2L CG8827-PB, izoform B ANCE (34E2) Anon-EST: fe3D10 BG: DS08220.3 Br31, l (2) 34Eb CG8827 CURSĂ

Gallus gallus AS 27 Peptidil-dipeptidaza A

Homo sapiens Izoformă somatică ACE ACE1 17

Carboxycathepsin CD143 (17q23)

Antigen CD143 DCP

Dipeptidil carboxipeptidaza I DCP1

Dipeptidă hidrolază HGNC: 2707

Kininaza II MGC26566

Peptidaza P PDH

Peptidil dipeptidază-4

Peptidil-dipeptidaza A

Peptidil-dipeptid hidrolază

ECA testiculară

Musculus Dipeptidil peptidaza CD143 somatic 11

MGI: 87874 (11 65,0 cM)

Pan troglodytes Dipeptidil carboxipeptidaza I DCP1 17

Similar cu ACE

Rattus norvegicus Dipeptidil carboxipeptidaza I DCP1 10

Kininaza II RGD: 2493 (10q32.1) StsRR92

Angiotensina II este un vasoconstrictor puternic. De asemenea, acționează asupra cortexului suprarenal, determinând eliberarea de aldosteron, care stimulează tubulii în rinichi, permițându-le să reabsorbeze mai mult sodiu și apă din urină. 2 Aceste efecte acționează direct pentru a crește cantitatea de lichid din sânge, compensând pierderea în volum și creșterea tensiunii arteriale. Angiotensina II mediază, de asemenea, creșterea și proliferarea celulelor prin stimularea diverselor citokine și factori de creștere. 3 Mai mult, angiotensina II poate induce disfuncție endotelială prin reducerea biodisponibilității oxidului nitric. 4 Aceste constatări subliniază importanța angiotensinei II în fiziopatologia cardiovasculară și motivează explorarea rolului RAS în ateroscleroză și alte rezultate cardiovasculare.

De asemenea, ACE joacă un rol important într-un alt sistem hormonal, cascada kinină-calikreină ( figura 1 ). ACE metabolizează bradicinina, care este un vasodilatator puternic, formând metabolitul inactiv bradicinina 1-5. Prin urmare, ACE joacă un rol proeminent în reglarea tensiunii arteriale și pe această cale. Neurokininele sunt o familie de neurotransmițători din sistemul nervos central (SNC) care joacă un rol cheie în transmiterea durerii, reglarea emoțiilor și alterarea răspunsurilor inflamatorii și imune. 5,6Deși rolul ACE în degenerarea acestor proteine ​​nu a fost întotdeauna replicat in vivo, 7 aceste descoperiri au declanșat studii asupra bolilor neurologice precum boala Parkinson, 8 depresie, 9-11și alte tulburări afective. 12 Cu toate acestea, rolul ACE în SNC nu se limitează la acești neurotransmițători. S-a demonstrat că ACE degradează peptida beta amiloidă in vitro, 13 dintre agenții biologici adversi principali implicați în patogeneza bolii Alzheimer (AD). 14,15 Astfel, dacă este prezent la niveluri suficiente in vivo, ACE poate împiedica sau reduce formarea plăcilor senile, un semn distinctiv al AD.

ACE Gene

Deși ACE este considerată a fi o enzimă de mamifere, omologi de secvență strânsă cu activități foarte similare se găsesc într-o gamă largă de specii de animale. Tabelul rezumă aceste omologi. În Homo sapiens , gena care codifică ACE este localizată pe brațul lung al cromozomului 17 (17q23). Gena are o lungime de 21 kilo (kb) și cuprinde 26 de exoni și 25 de introni. În înregistrările Centrului Național pentru Informații Biotehnologice (NCBI), sunt enumerate peste 160 de polimorfisme ale genelor ACE , majoritatea fiind polimorfisme cu un singur nucleotid (SNP). Doar 34 dintre aceste polimorfisme sunt localizate în regiuni de codificare; 18 dintre ele sunt mutații missense.

Gena codează 2 izoforme ale ACE: forma somatică (sACE), cu o masă moleculară de 170 kDa, care este exprimată în țesutul somatic; și forma testiculară (testicul ACE [tACE], numită și ACE germinală [gACE]), cu o masă moleculară mai mică de 100 kDa, exprimată în celulele germinale din testicule. 16 Aceste 2 forme rezultă din inițierea de către 2 promotori diferiți. ACE somatică este transcrisă de la un promotor situat pe partea 5 'a primului exon (Spro) și duce la transcrierea tuturor exonilor. În ARNm matur sACE, exonii 1 până la 26 sunt transcriși, cu excepția exonului 13, care este divizat. ACE germinal, însă, este transcris de la un promotor intern specific, un fragment de 91 bp în intron 12 (Gpro); ARNm germinal include exonii de la 13 la 26. 17Cele două forme diferă în faptul că sACE are 2 site-uri active (N și C terminus), în timp ce tACE are un singur site activ analog cu porțiunea C-terminal a sACE. 5 Funcția detaliată a TACE nu este cunoscută, dar pare să joace un rol în reproducerea masculină. 18

Structura genei ACE poate fi rezultatul duplicării unei gene ancestrale. Exoanele 4 până la 11 și 17 până la 24, care codifică cele 2 domenii omoloage ale moleculei ACE, sunt foarte similare atât ca mărime, cât și în secvență. 19 La toate speciile de mamifere în care gena a fost clonată (oameni, șoareci și iepure), se pare că este duplicată. În Drosophila melanogaster , însă, gena enzimelor asemănătoare ACE nu este duplicată; această formă poate semăna cu forma ancestrală a genei înainte de duplicare. 20 Speculațiile sugerează că duplicarea s-ar fi putut întâmpla în urmă cu aproximativ 300 de milioane de ani.

ACE2

Un omolog al ACE, ACE2, a fost descoperit și la la om. Clonată din țesuturi cu insuficiența cardiacă umană și din bibliotecile ADNc de limfom [21,22], analiza secvenței genomice a ACE2 a relevat că gena conține 18 exoni și hărți către Xp22 [22].

Descoperirea acestei enzime a dus la creșterea conștientizării că peptidele angiotensinei, altele decât Ang II, au activitate biologică și și importanță fiziologică ( Figura 1 ).

Acțiunile vasodilatatoare raportate de Ang 1-7, [23] împreună cu potențialul implicare a ACE2 atât în ​​degradarea Ang II, cât și în producția de Ang 1-7, adaugă un alt nivel de complexitate RAS. [24,25]

Studiile in vitro indică faptul că eficiența catalitică a ACE2 pentru Ang II este de 400 de ori mai mare decât pentru Ang I, [26] fapt care indică faptul că rolul major al ACE2 este conversia angiotensinei II în angiotensina 1-7.

Rolul potențial al angiotensinei 1-7 ca peptidă cardioprotectoare cu acțiuni vasodilatatoare, antigrow și antiproliferative a fost recunoscut relativ recent. [23,27]

ACE2, cu toate acestea, are o distribuție mult mai restrânsă decât ACE.

La oameni, transcrierile ACE2 au fost identificate în plămâni, inimă, rinichi și testicule. [21,22]

În această recenzie, ne concentrăm pe genetica ACE și am dori să le indicăm cititorilor interesați de ACE2, existența unui numărul mare de articole disponibile pe acest subiect.

Controlul genetic al nivelurilor ACE

Nivelurile ACE plasmatice sunt stabile când sunt măsurate în mod repetat la același individ, în timp ce se observă diferențe interindividuale mari. [28]

Acest lucru sugerează un control puternic pe termen lung al nivelurilor plasmatice, posibil cu origini genetice. În 1988, Cambien și colab. 29 au efectuat analize de segregare în 87 de familii nucleare sănătoase (Studiul Nancy) și au demonstrat că un posibil efect genic major reprezintă 29%, 29% și 75% din variația nivelurilor ACE ajustate la vârstă la tați , mame și, respectiv, urmași. [29]

În 1990, Rigat și colaboratori [30] a publicat un raport important care a furnizat impulsul studierii ulterioare a polimorfismelor din această genă.

Au descoperit un polimorfism care implică prezența (inserarea, I) sau absența (ștergerea, D) a unei secvențe de ADN de 287-pp în intronul 16 al genei (NCBI ref. SNP ID: rs1799752).

Nivelurile medii ale activității ACE la purtătorii de DD au fost de aproximativ două ori mai mari decât cele găsite la persoanele genotip II. [30]

Subiecții cu genotipul ID au avut niveluri intermediare care indică codominanță.

Polimorfismul I / D a reprezentat aproximativ jumătate (47%) din variația observată la nivelurile ACE din acest grup de studiu.

Studiile ulterioare au arătat că implicarea polimorfismului I / D nu se limitează la nivelurile de ACE în plasmă și este, de asemenea, detectată la nivelurile ACE tisulare. [31,32]

ACE polimorfismul I / D a fost initial detectat prin analiza polimorfismului lungimii fragmentelor de restricție (RFLP). 30 Prima detectare a acestui polimorfism bazată pe reacția în lanț a polimerazei (PCR) a fost raportată de Rigat și colab., 33 care au utilizat un set de primer care flanchează secvența de inserție. Studii bazate pe familie efectuate de Shanmugam et al, 34cu toate acestea, a arătat posibilitatea de a greși heterozigoți de identificare cu această metodă PCR. Amplificarea preferențială a alelei D mai scurte poate provoca clasificarea greșită a aproximativ 4 până la 5% din genotipurile ID la DD. Prin urmare, a fost formulată o reacție suplimentară de amplificare a PCR pentru confirmarea genotipurilor DD obținute în primul PCR standard, incluzând un primer simț nou specific specific inserției. 34 Această combinație de reacții PCR standard și de confirmare a fost ulterior utilizat în mai multe studii.

Polimorfisme funcționale în gena ACE Deși polimorfismul ACE I / D este adesea studiat în ceea ce privește tulburările cardiovasculare și alte complexe, localizarea într-o regiune care nu codează face puțin probabil să fie o variantă funcțională. Deoarece importanța fiziologică a polimorfismului I / D a fost descoperită prin asocierea sa cu nivelurile de ACE plasmatică, 30 de mulți investigatori au urmat aceeași linie de anchetă, studiind asocierea între alte variante la nivelurile genice și plasmatice, pentru a găsi polimorfisme funcționale. În 1996, Villard și colab. 35 au sugerat 2 loci de caracteristici cantitative (QTLs) care controlează nivelurile ACE. Ei au argumentat că un QTL era în dezechilibru de legătură strânsă (LD) cu polimorfismul I / D, iar cel de-al doilea QTL era încă identificat, posibil în regiunea 5 'a genei. 35

Keavney și coworkers 36 au analizat nivelurile ACE plasmatice și 10 polimorfisme (inclusiv celebrul polimorfism I / D) care se întinde pe 26 kb din genă în familiile britanice caucaziene ( Figura 2 a). Din cauza unui dezechilibru puternic de legătură care funcționează asupra acestei mici regiuni cromozomiale, acestea au dezvăluit un număr limitat de haplotipuri. 36 Au construit un arbore haplotip (cladogramă) cu trei ramuri principale (cladele A până la C), care reprezintă 90% din haplotipurile observate ( figura 2b). Clada C este cea mai probabil derivată din clada A și B după un eveniment ancestral de recombinare. Ei au observat că clada C seamănă foarte mult cu clada B în influența sa asupra nivelurilor ACE și au concluzionat, spre deosebire de Villard și colab., 35că varianta funcțională este situată în aval de punctul ancestral de rupere și că nu există nicio variantă semnificativă în promotor sau în alte secvențe amonte 36 ( Figura 2b). Ultimele trei polimorfisme, 4656 (CT) 3/2 (denumite și 23945 (CT) 2/3 ), 2350G / A (14521G / A, rs4343) și I / D, nu au prezentat nicio substituție în interiorul cladelor; în consecință, nu s-au putut face inferențe diferențiale cu privire la influența lor asupra nivelurilor ACE. 36

Amplasarea acestui punct de punct ancestral putativ a fost perfecționată mai târziu, în 1999, de același grup de investigatori. 37 Rezultatele acestei analize, combinate cu rezultatele lor anterioare, 36 au indicat că punctul de întrerupere ancestral este în aval de polimorfismul 06435 (rs4305, situat în intron 5). Pe baza acestor noi descoperiri, exonii 1 la 5, intronii 1 la 4 și o parte din intronul 5 au fost, de asemenea, excluse din regiunea care poate conține polimorfismul funcțional. 37

Din cauza LD ridicată între polimorfismele din această zonă, haplotipurile ACE trebuiau determinate la alte populații cu diferite istorii evolutive recente pentru a căuta puncte de rupere ancestrale suplimentare. Mai multe studii au demonstrat o mai mare diversitate genetică în rândul populațiilor cu descendență africană, 38-40ceea ce ar trebui să crească probabilitatea observării haplotipurilor recombinate și să ajute la cartografierea fină. Punând în aplicare această idee, Zhu și colab. 41 s-au concentrat asupra regiunii 3 ′ rămase a genei ACE , genotificând 7 polimorfisme bi-alelice pe un segment de 13 kb în 159 afro-caribbezi din Jamaica ( figura 3 a). Din 28 de haplotipuri, opt au apărut cu o frecvență ≥4,4%, reprezentând> 80% dintre cromozomi și ar putea fi grupate în trei clade principale ( figura 3b ). Nivelurile ACE plasmatice au fost similare în cadrul fiecărei clade, ceea ce indică faptul că segmentul incluzând ultimii 2 polimorfisme nu a fost probabil să conțină polimorfismul funcțional. 41Analizele ulterioare au relevat faptul că cladele A și B au dus la fenotipuri similare, în timp ce a existat o diferență semnificativă între cladele A și C. Aceste rezultate au indicat că polimorfismul funcțional ar putea fi situat în regiunea cuprinsă între 15214G / A (rs4344) în intron 18 și 23945 (CT) 2/3 în UTR 3 ′, excluzând binecunoscutul polimorfism I / D din intron 16 ( Figura 3 ). 41

Într-o altă încercare, prin secvențierele regiunilor transcrise ale genei ACE (inclusiv 11 kb în regiunea 5 ′ și 3,5 kb în regiunea 3 ′), Soubrier și colegii 42 au notat 62 de situri polimorfe. Analiza lor a confirmat constatările anterioare de Zhu și colab. 41 care au relevat un al doilea punct de rupere ancestral apropiat de polimorfism 23945 (CT) 2/3 . În plus, Cox și colab. 43 au identificat 4 site-uri polimorfe asociate nivelurilor ACE folosind un eșantion de indivizi nigerieni. Trei dintre aceste polimorfisme au fost localizate în regiunea 3 'descrisă anterior. Celălalt polimorfism (A6138C) a fost localizat în secvența de codificare în amonte. 43Prezența unui potențial polimorfism funcțional în regiunea 5 ′ a fost, de asemenea, confirmată de McKenzie et al 44 în 2005. Ei au descoperit că 2 polimorfisme din 5 UTR au fost asociate cu concentrații plasmatice ACE. Aceste constatări sunt în conformitate cu rapoartele anterioare care susțin posibilitatea ca 2 QTL-uri legate de ACE să controleze activitatea ACE. 35

Prezența încă un QTL, localizat pe cromozomul 4, a fost recent sugerat. 45 Într-o analiză de legătură multipunctă realizată în 29 de pedigree din Studiul de inimă al familiei San Antonio, Kammerer et al 45 au arătat dovezi puternice că un QTL situat pe cromozomul 17 în apropierea locului structural ACE și un al doilea QTL pe cromozomul 4 lângă markerul D4S1548, au fost ambele asociate cu nivelurile ACE plasmatice. Dovada prezenței acestui nou QTL a rămas puternică, chiar și după ajustarea primului QTL în apropierea genei ACE . 45 Natura acestui nou loc rămâne necunoscută. Dacă noul QTL reprezintă o genă regulatoare, această descoperire ar putea ajuta la explicarea unora dintre rezultatele paradoxale cu privire la relația dintreGena ACE , activitate ACE și rezultate clinice și ar putea ajuta la dezvoltarea mijloacelor alternative de profilaxie și tratament.

Efectele patofiziologice ale ACE D Polimorfism / I

Deși natura și locația polimorfismului funcțional, sau a polimorfismelor, responsabile pentru nivelurile de ACE plasmatice rămân un mister, toate studiile efectuate în populații caucaziene au indicat că majoritatea polimorfismelor din regiunea candidată a genei sunt strâns legate de I / D polimorfism. Prin urmare, cercetătorii au continuat să folosească polimorfismul I / D ca marker valid pentru studierea asociațiilor dintre polimorfismul (funcțiile) necunoscut (e) și condițiile fiziopatologice. Într-un experiment pe bărbați normotensivi, de Ueda și colab., 46 după perfuzia de Ang I, nivelurile venoase de Ang II și creșterea tensiunii arteriale au fost mai mari la purtătorii de DD comparativ cu purtătorii II. Această constatare nu a fost însă replicată într-un alt studiu publicat în același an. 47Alterarea altei funcții a enzimei ACE, degradarea bradicininei, au fost de asemenea studiate in vivo. Au fost observate 48 de corelații semnificative între numărul de alele D și concentrațiile de BK1-5 (produsul inactiv) și raportul dintre BK1-5 și bradicinină.

Dovada favorizează ipoteza că polimorfismele funcționale, legate cu polimorfismul I / D, sunt implicate în condiții fiziopatologice prin intermediul sistemelor renină-angiotensină și kinină-calikreină. În mod firesc, sunt de așteptat și asocieri între polimorfismul I / D și boală, iar un număr imens de studii publicate până acum au investigat asocierea dintre polimorfismul I / D și numeroase rezultate clinice. Aceste investigații au inclus nu numai prezența sau incidența bolii, dar au vizat și alte aspecte, cum ar fi simptomele și manifestările, eficacitatea medicamentelor și terapiilor, interacțiunea cu alți factori genetici sau de mediu, ratele de recuperare, evoluția bolii și supraviețuirea. Fiecare dintre aceste subiecte necesită o revizuire detaliată a ei. Aici, vom limita revizuirea la rezultatele cele mai frecvent studiate.

ACE I / D Polimorfism și rezultate clinice

ACE I / D Polimorfism și tensiune arterială

Într-un studiu de legătură, Jeunemaitre și colab. 49 nu au găsit nicio dovadă care să susțină legătura dintre locusul ACE și hipertensiunea arterială esențială. De asemenea, în Studiul olandez de hipertensiune și descendență, Schmidt și colab. 50 nu au reușit să găsească o asociere semnificativă între polimorfismul I / D și starea tensiunii arteriale la subiecți cu tensiune arterială ridicată sau scăzută și descendenți. Această lipsă de asociere a fost constatată în mod repetat în studiile ulterioare. 51-55Mai multe alte studii au raportat însă o asociere pozitivă între alela D și tensiunea arterială ridicată. 56-58Prima meta-analiză pe această temă, publicată de Staessen et al, 59 a inclus 23 de studii până în octombrie 1996 și a constat în 28 de grupuri de control de caz cu un total de 6923 de subiecți. Un raport comun de cote (OR) de 1,10 [IC 95%: 0,95, 1,27] a indicat un risc crescut de 10% de hipertensiune arterială în genotipul DD versus II, care nu a fost o asociere semnificativă din cauza intervalului de încredere care acoperă valoarea nulă a unuia. Cu toate acestea, a existat un indiciu puternic de eterogenitate în rândul rapoartelor ( Ppentru eterogenitate <0,01). Analizele de sensibilitate au fost efectuate în subgrupuri bazate pe sex, etnie, vârstă medie (cu un punct de întrerupere de 50 de ani) și metodă de genotipare (cu sau fără grund specific pentru inserție). A existat o relație semnificativă între alela D și hipertensiunea la femei și la asiatici. 59 În toate celelalte subgrupuri, nu a existat nicio asociere.

O altă meta-analiză, publicată de Agerholm-Larsen și colab., 60 a fost limitată la caucazieni și analize ale tensiunii arteriale ca variabilă continuă. Criteriile de selecție au dus la o colecție de 19 studii cu foarte puțină suprapunere cu metaanaliza anterioară. Rezultatele reunite a mai mult de 15 942 de persoane au indicat, de asemenea, că tensiunea arterială nu a fost influențată de genotip (diferența medie ponderată = 0,5 mm Hg [IC 95%: -0,5, 1,8] pentru genotipul DD versus II). În 2005, într-o revizuire a geneticii hipertensiunii umane, Agarwal et al 61 au enumerat un set complet nou de 26 de studii de asociere, dintre care 12 au publicat rezultate pozitive și 14 au publicat rezultate negative.

Relația de cauzalitate între funcția genei ACE și tensiunea arterială a fost testată la șoareci având 1, 2 sau 3 copii funcționale ale genei la locul său normal cromozomial. 62 Deși activitatea ACE serică a crescut progresiv de la animalele cu o copie la animalele cu 3 exemplare, tensiunile arteriale ale șoarecilor nu au diferit semnificativ. Autorii au ajuns la concluzia că modificările cantitative ale expresiei ACE ar afecta în mod observabil tensiunile arteriale atunci când sunt însoțite de factori suplimentari de mediu sau genetici.

Cea mai mare parte a acestor dovezi indică faptul că orice efect al alelei D asupra hipertensiunii arteriale trebuie să fie foarte mic. Descoperirile la șoareci și datele privind asociațiile posibile din studiile umane între asiatici sau la femei au declanșat multe investigații cu privire la interacțiunea dintre ACE și alte gene sau factori de mediu. În ciuda unor constatări promițătoare, aceste rezultate rămân a fi reproduse.

ACE I / D Polimorfism și ateroscleroză

Numeroase studii au investigat asocierea dintre polimorfismul ACE I / D și ateroscleroza folosind măsurători ale grosimii mediei (IMT) ale arterei carotide. Am raportat o asociere pozitivă între alela D și IMT carotid comun într-o meta-analiză care conține 9833 subiecți din 23 de articole publicate până în octombrie 2002. 63 În această meta-analiză, rezultatele generale au fost concordante între caucazieni și asiatici, dar asociația a fost mai puternic în rândul populațiilor cu risc ridicat (adică subiecți cu boli subiacente, cum ar fi bolile cerebrovasculare, diabetul sau hipertensiunea) În populațiile cu risc scăzut / general, diferența medie ponderată între DD și II a fost de 0,01 mm [IC 95%: 0,00, 0,02], în timp ce la populațiile cu risc ridicat această diferență a fost de 0,07 mm [IC 95%: 0,03, 0,12].63 Această constatare a sugerat existența unei posibile interacțiuni între factorii de risc cardiovascular șipolimorfismul ACE în ceea ce privește IMT carotid. Asocierea dintregenotipul ACE și ateroscleroza a fost, de asemenea, evaluată folosind calcifierea coronariană ca măsură a aterosclerozei coronariene, 64,65și măsurători de autopsie a aterosclerozei aortice, 66,67dar rezultatele au fost discordante. În general, este de așteptat o asociere modestă pozitivă între alela D și ateroscleroză, în special la cei care prezintă alți factori de risc cardiovascular (genetic sau de mediu).

ACE I / D Polimorfism și boli coronariene și accident vascular cerebral

Primul studiu raportând o asociere pozitivă între alela D și infarctul miocardic (MI) a fost publicat în 1992 de Cambien și colab. 68 Într-un studiu de caz-control multi-centru pentru 610 cazuri și 733 de controale (Etude Cas-Temoin de l’Infarctus du Myocarde [ECTIM]), ei au descoperit că genotipul DD a fost semnificativ mai frecvent la pacienții de sex masculin cu IM decât la controale , în special în indivizii cu risc scăzut (subiecții cu un indice de masă corporal scăzut și niveluri plasmatice scăzute de apolipoproteină B). Totuși, acest rezultat nu a fost replicat într-un studiu de asociere amplu realizat de Agerholm-Larsen și colab., 69care a investigat asocierea într-un studiu de caz-referent (n = 10 150), precum și într-un studiu de cohortă retrospectivă (n = 7263); nu au fost găsite diferențe semnificative în IM incident sau orice altă manifestare a bolii ischemice cardiace între clasele genotipului.

Trei ani mai târziu, același grup de cercetare a publicat o metaanaliză, 60 în care au inclus propriul studiu 69 și alte 21 de studii de asociere. Cinci dintre aceste studii au fost mari (n> 600), iar restul a fost mic. Deși rezultatul general a fost pozitiv (OR combinat = 1,21 [IC 95%: 1,11, 1,32] pentru DD versus genotipuri ID / II), Agerholm-Larsen și colab. 60 au indicat că studii mici au arătat un efect mai accentuat asupra riscului de IM și a sugerat că aceste studii ar putea fi chiar responsabile pentru estimarea generală a unui raport semnificativ de cote. Într-un alt studiu publicat în același an de Keavney și coworkers, 70autorii au demonstrat, de asemenea, diferența dintre studii mici și mari. Au fost 48 de studii mici (fiecare cu mai puțin de 200 de cazuri), care au totalizat 5092 de cazuri și au obținut un coeficient de cotă pentru IM și alte boli coronariene asociate cu genotipul DD de 1,43 [99% CI: 1,28, 1,60]; 29 de studii publicate mai mari, cu un total de 14 868 de cazuri, au obținut un raport de cote combinate de 1,04 [CI 99%: 0,97, 1,12]. 70

În ciuda ideii că studiile mici ar putea fi predispuse la părtinire din cauza unui nivel mai scăzut de control al calității sau proiectarea studiului, modelul studiilor mici față de cele mari ar putea indica importanța ACEpolimorfism în anumite subgrupuri. Cu alte cuvinte, deși eșantioanele reprezentative ale populației generale nu indică o asociere între alela D și boala coronariană, o asociere este de obicei detectată în probe mai mici nereprezentative. Acest lucru este în concordanță cu rezultatele populațiilor cu risc ridicat față de risc scăzut în ceea ce privește ateroscleroza, deoarece probele selective sunt de obicei derivate din populații de studiu particulare, cum ar fi grupurile de pacienți spitalizate sau cu risc ridicat. În legătură cu bolile coronariene, alela D nu este importantă din punct de vedere clinic în populația generală, dar poate juca un rol important în anumite grupuri de pacienți.

Într-o abordare diferită, Katzov și colab. 71 au analizat clade folosind mai multe SNP-uri în gena ACE , în loc să genotipeze doar polimorfismul I / D. Ei au găsit o serie de asociații de fenotipuri semnificative (inclusiv MI) într-un eșantion de mai mult de 4000 de indivizi suedezi care poate nu au fost detectabili prin tastarea doar a polimorfismului I / D. Acest lucru evidențiază importanța unei clasificări sporite a genotipurilor pentru a evita clasificarea greșită genotipică și pentru a obține o mai bună perspectivă asupra geneticii bolilor complexe, cum ar fi MI.

Atât accidentul vascular cerebral, cât și accidentul vascular ischemic rezultă frecvent din tromboza suprapusă pe plăcile aterosclerotice. Această asemănare fiziopatologică i-a determinat pe investigatori să studieze rolul polimorfismelor genice ACE în AVC. Deși 2 meta-analize au raportat asocieri pozitive semnificative între alela D și accident vascular cerebral ischemic, 72,73acesta nu a fost confirmat într-un studiu prospectiv de control potrivit. 74 În Studiul de Sănătate al Medicilor, 348 de subiecți care au fost sănătoși la înscriere și au prezentat un accident vascular cerebral în timpul celor 12 ani de urmărire au fost corelați cu același număr de controale. 74 Ratele de probă asociate cu alela D în cadrul modelelor recesive și dominante au fost 1,10 [IC 95%: 0,80, 1,51] și, respectiv, 1,22 [95% CI: 0,83, 1,79]. Au fost mai multe rezultate negative decât pozitive în studiile ulterioare. Prin urmare, orice efect al genei ACE este foarte mic în raport cu accidentul vascular cerebral ischemic. Deși rolul interacțiunilor genă-genă sau gen-mediu nu poate fi exclus, studiile cu dimensiuni mai mari de eșantion vor fi necesare pentru a le detecta.

Polimorfismul ACE și nefropatie diabetică

Din cauza rolului central al ACE în sistemul renină-angiotensină, numeroase studii au abordat rolul polimorfismului I / D în afecțiunile microvasculare, în special în diabet. Într-o căutare a literaturii din octombrie 1996, Staessen și colegii 59a găsit o asociere între I / D și nefropatie diabetică folosind 11 studii publicate (combinate OR = 1,56 [95% CI: 1,27, 1,91] pentru genotipul DD versus II). În analiza de sensibilitate bazată pe etnie, vârstă, metoda de genotipare (cu sau fără primerii de inserție specifici) și factorul de impact al jurnalelor, alela D a fost asociată semnificativ cu un risc crescut de nefropatie diabetică în toate subgrupurile, cu excepția studiilor din pe care subiecții fuseseră generați în absența primerilor specifici pentru inserție (colectat OR = 1,23 [IC 95%: 0,96, 1,58]). Aceasta, pe de o parte, confirmă asocierea dintre polimorfismul I / D și nefropatia diabetică și, pe de altă parte, demonstrează încă o dată importanța clasificării greșite genotipice în studiile de asociere care sunt concepute pentru a detecta o dimensiune a efectului relativ mică.

Cea mai recentă meta-analiză pe această temă a fost realizată pe studii publicate între 1994 și 2004, cuprinzând 14 727 de subiecti. 75 de cincizeci și opt de studii au fost identificate care au acoperit toate publicațiile utilizate în metaanalizele anterioare, deși 11 dintre ele au fost excluse din motive precum date duplicate sau detalii disponibile insuficiente. A existat un risc semnificativ mai mare de nefropatie diabetică la purtătorii alelei D față de grupul genotip II (reuniune OR = 1,28 [IC 95%: 1,14, 1,45]). Această asociere a fost confirmată într-o cohortă bine stabilită (DCCT / EDIC Genetics Study) 76 pentru polimorfismul I / D, precum și în alți 2 markeri (rs1800764 și rs9896208).

Cauzalitatea care a stat la baza asocierii dintre gena ACE și nefropatia diabetică a fost abordată într-un studiu realizat pe animale de Huang et al. 77 Aceștia au indus diabet la șoareci având 1, 2 sau 3 copii ale genei. În 12 săptămâni, șoarecii diabetici cu 3 copii au dezvoltat tensiuni arteriale și proteinurie mai mari. Proteinuria a fost corelată cu nivelurile ACE plasmatice la șoarecii diabetici cu 3 copii. 77 Acest studiu demonstrează că o creștere genetică modestă a nivelurilor de ACE este suficientă pentru a provoca nefropatie. În total, există dovezi solide pentru o relație de cauzalitate între funcția genei ACE și nefropatia diabetică.

Polimorfismul ACE și performanțe musculare

Montgomery și coworkers 78 au raportat modificări ale masei ventriculului stâng asociate cu alela D. O sută cincizeci și șase de recruți militari au suferit 10 săptămâni de pregătire fizică; masa ventriculară stângă medie a crescut cu 2,0, 38,5 și 42,3 g în purtătorii II, ID și DD, respectiv ( P <0,01). Într-un studiu ulterior, Montgomery et al 79 au găsit, de asemenea, o asociere între polimorfismul ACE și performanța fizică. Distribuția genotipului a 25 de alpinisti britanici de elită a fost comparată cu cea a 1906 bărbați britanici fără boli cardiovasculare. Deși frecvențele genotipului au fost în HWE la ambele probe, au existat excese relative ale genotipului II și deficiențe proporționale ale genotipului DD la alpinisti. 79Această observație a fost replicată atunci când a fost testată cu 64 de ramești naționali australieni, 80 91 de alergători olimpici britanici de calibru, 81 217 sportivi ruși, 82 60 de sportivi de elită spanioli, 83 120 de înotători din campionatele europene și Commonwealth, 84 și 35 de înotători de la Campionatele Mondiale , 85 în special la sportivi la distanță foarte mare.

Asocierea alelei I cu rezistență îmbunătățită este în concordanță cu asocierea alelei D cu hipertrofie ventriculară stângă. Purtătorii alelei D pot dezvolta hipertrofie atribuită eficienței metabolice scăzute.

Polimorfismul ACE și boala Alzheimer

Deoarece ACE degradează peptida beta amiloidă in vitro, 13 niveluri mai mari de ACE pot juca un rol protector în fiziopatologia AD. Kehoe et al 86 au raportat pentru prima dată o asociere între polimorfismul I / D și AD. În studiul lor de control-caz, a fost găsită o asociere pozitivă între prezența alelei I și AD (OR = 2,43 [95% CI: 1,35, 4,39] pentru genotipurile II / ID versus DD). Ulterior, ei au testat aceeași asociere în două probe independente de control de caz și au reprodus cu succes constatarea lor. Autorii au declarat că, având în vedere constatările replicate și nivelurile ridicate de semnificație statistică după corectarea Bonferroni, este puțin probabil ca aceste rezultate să fie fals-pozitive rezultate din stratificarea etnică sau testarea multiplă. 86Această asociere a fost ulterior examinată în mai multe studii. O metaanaliză cumulativă a relevat faptul că, după doar 4 studii, raportul de probe combinate (OR = 1,25) a atins semnificația și a rămas stabil după aceea, pe măsură ce s-au adăugat alte studii. 87

Pentru a caracteriza mai bine natura asociației observate, Kehoe și colab. 88 au efectuat o analiză de haplotip prin genotiparea a 7 SNP în 5 probe independente de control de caz, care au inclus peste 3100 de persoane. Ei au descoperit că, la pacienții cu AD, a existat un exces de unul dintre haplotipuri (care conține alela I) în 4 seturi diferite de cazuri și controale; acest rezultat a fost în concordanță cu datele meta-analizei. 88 În plus, ei au descoperit că SNP rs4291, care a arătat cel mai puternic efect asupra AD al celor 7 SNP, a fost și SNP cel mai slab legat cu polimorfismul I / D (r 2 = 0,46). În schimb, SNP rs4343, care a arătat cel mai slab efect asupra AD, a fost puternic legat de polimorfismul I / D (r 2 = 0,91). 88Acest lucru sugerează că dependența de polimorfismul I / D a contribuit probabil la multe dintre rezultatele negative raportate anterior. Kehoe et al 88 au estimat că dacă rs4291 ar fi în LD complet cu varianta sau variantele funcționale „adevărate”, utilizarea I / D ca marker ar necesita dublarea dimensiunii eșantionului pentru a detecta aceeași dimensiune a efectului. În general, asocierea dintre alela I și AD este bine stabilită. Știind că polimorfismul I / D nu este varianta funcțională, puterea statistică scăzută ar putea fi principalul motiv de neconcordanțe între studii.

ACE Polimorfismul ACE și longevitatea

Asocierile polimorfismului ACE cu dezvoltarea, prognosticul sau supraviețuirea din mai multe boli au declanșat întrebări cu privire la influența ACE asupra longevității. În 1994, în prima încercare de a răspunde la aceste întrebări, Schachter et al 89 au genotipat 338 de centenari și 164 de persoane de control, în vârstă de 20 până la 70 de ani, din cohorta stabilită de Centrul d’Etude du Polymorphisme Humain (CEPH) din Paris, Franța . În mod surprinzător, a existat o frecvență crescută a genotipului DD în grupul centenar comparativ cu grupul martor (0,40 față de 0,26, P<0,01). Această constatare a fost neașteptată, având în vedere rapoartele publicate despre efectele adverse ale genotipului DD asupra bolilor cardiovasculare. Autorii au speculat că riscul cardiovascular conferit de alela D este compensat de un posibil efect de protecție pe termen lung. Un astfel de efect poate oferi un avantaj selectiv timpuriu sau o inversare tardivă a influenței sale negative de supraviețuire. 89

Studiile ulterioare nu au confirmat însă constatarea lui Schacter. În 2000, Blanché et al 90 au testat calitatea primului raport. 89 Retiparea cohortei centenarului din 1994 a evidențiat 17 inconsistențe, confirmate de un al doilea experiment, ceea ce a dus la o diferență de 5% cu datele inițiale. Majoritatea discordanțelor au rezultat din detectarea alelelor I în noile date, care nu erau prezente în datele din 1994. 90 Mai mult, autorii au folosit 560 de centenari francezi suplimentari, fiecare însoțit de un individ mai tânăr de același sex și origine geografică. Comparația frecvențelor alelice și genotipice nu a reușit să dezvăluie o diferență între populația centenară și cea de control. 90

Într-un studiu efectuat pe 6968 de persoane în vârstă din Studiul Rotterdam de Arias-Vasquez et al 91 , un risc crescut de mortalitate timpurie (sub 65 de ani) a fost asociat cu genotipul DD (raport de risc [HR] = 1,8 [95% CI: 1.1 , 2.9] pentru genotipul DD versus II). Nu a existat nicio dovadă a unei asocieri cu mortalitatea la subiecții mai mari de 65 de ani. În analizele stratificate, această asociere a fost extrem de semnificativă la fumători (HR = 3,1 [IC% 95: 1,5, 6,3]) și nu a fost observată la nefumători (HR = 1,2 [IC 95%: 0,7, 2,1]). 91 De asemenea, a fost raportată interacțiunea dintre fumat și polimorfismul I / D în ceea ce privește tensiunea arterială 92 și ateroscleroza carotidă și coronariană. 93,94În total, deși asocierea dintre gena ACE și longevitatea nu a fost confirmată, există dovezi că această genă joacă un rol în mortalitatea timpurie. Asocierea cu mortalitatea a fost observată atât pentru cauze de deces cardiovasculare, cât și necardiovasculare, ceea ce indică importanța ECA în diferite sisteme fiziopatologice. 91

Rezumat

Cercetările asupra polimorfismelor ACE au început atunci când Cambien și colab 29 au raportat că nivelurile ACE circulante sunt sub control genetic substanțial. S-a atras atenția asupra unui polimorfism de inserție / ștergere în intron 16 când Rigat și colab. 30 au declarat că reprezintă aproximativ jumătate din variația observată a nivelurilor plasmatice. Localizarea acestui polimorfism într-o regiune noncodificantă a genei face, însă, puțin probabil să fie o variantă funcțională. În ciuda efortului considerabil, locația precisă a polimorfismului funcțional sau a polimorfismelor este încă necunoscută; cel mai probabil este localizat în regiunea dintre intron 18 și 3 'UTR. 41 Nu poate fi exclusă posibilitatea unui alt polimorfism funcțional în regiunea 5 ′, 35,44și prezența încă un QTL, localizat pe cromozomul 4, a fost recent sugerat. 45

Un număr imens de studii au fost publicate care investighează asocieri ale polimorfismului I / D cu diferite condiții fiziopatologice. Multe studii au găsit asocieri semnificative, în timp ce altele nu au confirmat aceste constatări. Metaanalizele nu au rezolvat întotdeauna aceste controverse și trebuie luate în considerare limitele studiului în căutarea unei explicații pentru descoperirile contradictorii. Metaanalizele cumulate, așa cum sunt prezentate de Lehmann și colab., 87 ne pot oferi o perspectivă mai bună asupra efectelor subiacente.

Pe baza metaanalizelor și a studiilor de asociere bazate pe populație discutate aici, așteptările sunt ca mărimile efectelor eventualelor asociații între polimorfismul ACE și tulburările complexe să fie relativ mici. Pentru a detecta asocieri incrementale, este necesar să se ia în considerare atât validitatea, cât și precizia studiilor planificate. Clasificările greșite atât în ​​datele genotipice cât și în cele fenotipice pot duce la rezultate fals-negative sau fals-pozitive. Pentru a evita clasificările greșite genotipice, utilizarea haplotipurilor, în loc de polimorfismul I / D, este recomandată cu tărie pentru viitoarele studii de asociere. O astfel de încercare a fost făcută de Katzov și colab. 71cu rezultate promițătoare. În ceea ce privește clasificarea greșită fenotipică, trebuie luată în considerare complexitatea bolilor. Includerea diagnosticurilor incerte trebuie evitată și, după caz, subclasele unui fenotip trebuie evaluate separat. Complexitatea fenotipurilor include, de asemenea, posibilitatea interacțiunilor multiple între gene, sau gene și factori de mediu. Au fost raportate multe descoperiri promițătoare despre astfel de interacțiuni cu polimorfismul ACE , dar rămân de replicat. Nu în ultimul rând, dar nu în ultimul rând, puterea unui viitor studiu de asociere ar trebui întotdeauna evaluată înainte de începerea colectării datelor. Studiile slabe, pe termen lung, pot duce la scenarii de prejudecăți ale publicării, care provoacă confuzie și pot induce în eroare investigațiile viitoare.

Original primit 14 octombrie 2005; retrimitere primită 20 februarie 2006; revizuire revizuită primită 7 aprilie 2006; acceptat 10 aprilie 2006.

Acest studiu a fost susținut de grantul 904-61-196 al Organizației Olandeze pentru Cercetări Științifice (NWO) și de Centrul pentru Biologia Sistemelor Medicale (CMSB)


(Fluierul)


Linkul direct catre Petitie

CEREM NATIONALIZAREA TUTUROR RESURSELOR NATURALE ALE ROMANIEI ! - Initiativa Legislativa care are nevoie de 500.000 de semnaturi - Semneaza si tu !

Comentarii:


Adauga Comentariu



Citiți și cele mai căutate articole de pe Fluierul:

Românii sunt ținuți ÎN MOD INTENȚIONAT cu Salarii de Mizerie pentru a fi o forță de muncă ieftină pentru MULTINAȚIONALELE STRĂINE. Salarii de MIZERIE de 300-450 de euro în toate regiunile țării.

TICĂLOȘII. IATĂ ce fac acești USR-iști, porecliți pe drept cuvânt "Uniunea lui Soros din România". Deputații USR s-au abținut la votul - ce marca Unirea Transilvaniei cu România - la legea privind declararea zilei de 4 iunie Ziua Tratatului de la Trianon

SCENE DE SEX la "Mireasă pentru fiul meu"? Ce au văzut telespectatorii, la TV, a creat isterie | VIDEO

"SOLUȚIA" LUI SOROS LA CRIZA COVID. Soros vrea ca țările UE să elibereze Titluri de Stat Perpetue pentru ca popoarele UE să plătească VEȘNIC, 5 miliarde de euro dobândă în FIECARE an. Asta l-a dus mintea de speculant pe SOROS.

Birkenfeld sau Birkenau? După românul MORT la SPARANGHEL, un alt ROMÂN a MURIT la muncă în GERMANIA, de data aceasta în ABATOR. Sparanghela Merkel și Guwernerul Klaus îi au pe conșțiință pe acești morți....lipsiți de cea mai elementară protecție sanitară

Avionul Egyptair prăbuşit: Analiza uneia din cutiile negre arată că s-a pronunţat cuvântul "foc"

Putin vrea să introducă în programa școlară ora de "Patriotism". Progresiștii se vor zvârcoli ca nebunii...ca să arate "cât de greșit este sa înveți copiii sa fie patrioți".. N-o să mai poată destrăma Statele Naționale

Daniela Crudu, sex la Burlăciţa. Ce decizie au luat şefii show-ului după apariţia IMAGINILOR XXX

Roxana Nemeş, protagonista unui film XXX: "Eu sunt acolo. Toată lumea face asta"

JäGERCHOR. Prima măsură de RELAXARE: "Să vină nemții și austriecii să ne ucidă animalele". GuWernerul și LODOVIC LIBER la Vânătoare după 15 mai. Cadru Universitar Veterinar de la Cluj: "majoritatea vânătorilor sunt austrieci și germani. Mai vin și cehi"

MIREASĂ prinsă de CAVALERUL de ONOARE în timp ce îşi înşela SOŢUL: Cine este BĂRBATUL ăsta? VIDEO

Noile vaccinuri vor altera în mod permanent ADN-ul uman. Nimeni nu va mai şti exact decât producătorii lor ce anume vor modifica vaccinurile în ADN-ul fiecărei persoane.

Analiza Gramaticala - Clasele V - VIII

Eleve minore, sex cu un angajat al şcolii pentru bani şi ţigări. Violatorul a fost lăsat în libertate

PROVERBE CU OI, LUPI, CIOBANI SI MIEI. "Din orișice lemn îți place, Fluier nu se poate face"

Tg.Mureș. Ungurii sunt supărați pe votarea în parlamentul României a sărbătoririi Trianonului. "EMSZ: ura contra maghiarilor a devenit din nou o strategie națională în România". Care e Opinia Fluierul.ro?

O mireasă VIRGINĂ a fost şocată când a văzut ce are soţul ei în pantaloni. Ce a urmat este INCREDIBIL

Peste 61.000 de români CER "Opriți Jaful. Vreau să las moștenire copiilor mei această țară!". NATIONALIZAREA RESURSELOR, OPRIREA CONCESIONĂRILOR PE NIMIC ȘI INTERZICEREA VÂNZĂRII TERENURILOR LA STRĂINI - e cea mai semnată Petiție de pe PetițieOnline.net.

O fostă majoretă a făcut SEX cu un elev de 15 ani! Filmul XXX a ajuns pe INTERNET. VIDEO

Suferi de sindromul canalului carpian sau sciatica? Electromiografia poate ajuta la diagnosticare. Patricia Toboc, medic specialist neurolog, discuta online cu cititorii despre electromiografie, miercuri, ora 11:00

Incident la slujba de Paște organizată al Constanța. Un bărbat a fost ridicat de polițiști

Coronavirus: V-ați întrebat vreodată : Oare de ce Uniunea Europeană - una dintre cele mai bogate zone de pe Glob - a ajuns campioană mondială la morții de COVID? Peste 120.000 de morți în Europa (bilanț AFP)

CENZURA LUI WERNER ȘI LODOVIC IA FORME TOT MAI URÂTE. Înainte să vină BANII de la GUVERNUL Werner-Lodovic, B1 TV i-a dat afară pe jurnaliștii Sorina Matei și Andrei Bădin. Ambii Jurnaliști erau foarte critici la adresa lui Werner și a lui Lodovic

Către WERNER-MERKEL-și-KURZ. Strigăt de disperare : Muncitor sucevean la cules de sparanghel: ”Vrem să mergem acasă, nu vrem să murim aici pe capete”.Aceasta e mizerie mortală care s-a făcut și se face pe baza unui acord guvernamental Româno-German

MOSTENIREA nestiuta a lui Ceausescu! America e SOCATA de ce a descoperit in Romania
ULTIMA ORA: Dusmanii tarii vor sa ascunda adevarul

Țara vecină care va permite la capacitate maximă redeschiderea restaurantelor, barurilor și cafenelelor

COMENTARIU Valeriu Șuhan: Medicii, eroi pân' la bani... Sporurile promise de stat nu prea pot fi plătite

Germania: Cinci răniți, între care un copil de 2 ani, după ce un bărbat a intrat cu mașina în pietoni

Testele pentru anticorpi de Covid-19 dau rezultate greșite în jumătate din cazuri

ISTORIA, FĂRĂ PERDEA. Agentul sovietic "Salcîm", amanta lui Petru Groza și alte întîmplări de acum 75 de ani

Cu toții o știm și o iubim pe FETIȚA ZURLI. CUM ARATĂ în realitate, cum o CHEAMĂ de fapt și ce VÂRSTĂ are | VIDEO

O angajată de la Curtea de Apel București a fost confirmată cu Covid-19. Alți patru colegi sunt în izolare

ISTORICUL SIGLEI GOOGLE: Motorul de căutare şi-a schimbat designul

MINCIUNILE COVIZILOR DIN GUVERNUL KLAUS-MIKI-MAUS: Monopolul pe Informație înseamnă Monopol pe Minciună. Cifre care nu spun NIMIC. Aceștia sunt indivizii care ne vorbesc de "Fake-News"

Cum să-ţi cureţi vopseaua de ouă de pe mâini şi unghii cu ce ai la îndemână în casă

EFEMERIDE ASTRONOMICE - 27 mai

Peste 30.000 de oameni au trecut prin vamă fără control epidemiologic

O tânără de 26 de ani a șantajat un bărbat cu poze compromițătoare. Ce sumă ar fi obținut ca să nu divulge înregistrările intime

Tulcea: Plantație ecologică de migdal, aflată în ultimul an de conversie

Ion Cristoiu, interviu cu Vasile Astărăstoae: În momentul de față, 50% dintre români s-au prins c-au fost luați de proști. Pînă cînd va trece starea de alertă se ajunge la 60-70%

Tenorul Andrea Bocelli a dezvăluit că a avut coronavirus în martie. Motivul pentru care nu a vrut să anunțe public atunci

Metoda inedită folosită de un preot pentru a putea boteza un copil, în timpul pandemie

"Apa sărată distruge coronavirusul". Medicul Vasile Astărăstoae susține că mersul la mare poate fi benefic pe timpul pandemiei COVID 19

Computer tomograf, dotat cu inteligență artificială, care poate identifica infecția COVID-19, inaugurat la Spitalul "Victor Babeș" din Capitală

Ședință a Consiliului Suprem de Apărare a Țării, în sistem de videoconferință. Subiectele incluse pe ordinea de zi

CITATUL ZILEI

Coronavirus în lume LIVE UPDATE 27 mai: Cercetători: Pandemia de coronavirus este "departe de a se termina"

Aglomerație din nou în vamă: Aproape 40.000 de persoane au trecut frontiera în 24 de ore, cei mai mulți au intrat în România

ANSVSA prezintă miercuri măsurile specifice de prevenire a răspândirii SARS-COV2 în unitățile de alimentație publică

Solidaritate în bikini. Imaginea asistentei în costum transparent a stârnit o nouă modă în Rusia: FOTO

Italia anunță că 96% dintre persoanele decedate de coronavirus aveau și alte boli

Șapte persoane rănite, după ce două tramvaie s-au ciocnit în zona Șura Mare

670 - 800 e.n. INSCRIPȚIA Jupânilor CREȘTINI BIZANTINI Boilă și Butăul și tezaurul lor miraculos din obiecte de aur găsit în Banat la Sâmnicolaul Mare

FOTO | Ozana Barabancea, Loredana Groza și Mirela Boureanu Vaida, în cea mai sexy fotografie de colecție

Coronavirus în România, 27 mai. Lista completă a cazurilor pe fiecare județ

Patronul "Lactate Brădetu" Marius Badea: "Din punctul meu de vedere, categoric nu poate să fie o legătură între produsul nostru și moartea copiilor. Toate buletinele noastre de analiză, la toate produsele sunt în regulă. Nu avem niciun buletin prost”

Germania prelungește regulile de distanțare socială. Anunțul cancelarului Angela Merkel

PROGNOZA METEO pentru București. ANM anunță că vremea va fi instabilă. Urmează ploi torențiale cu grindină și vijelii

NEWS ALERT. Două tramvaie s-au ciocnit frontal în Capitală. Șapte călători au fost răniți

FLUIERUL A AVUT DREPTATE. BEBELUȘII S-AU ÎMBOLNĂVIT DE LA VACCINURI. Corpul de control al Guvernului a sesizat Parchetul în cazul copiilor cu SHU. "La 17 bebelușilor îmbolnăviți le fuseseră administrate anterior vaccinul hexavalent şi alte vaccinuri"


Pag.1 Pag.2 Pag.3 Pag.4 Pag.5 Pag.6 Pag.7
Pag.8 Pag.9 Pag.10 Pag.11 Pag.12 Pag.13 Pag.14 Pag.15
Pag.16 Pag.17 Pag.18 Pag.19

Nr. de articole la aceasta sectiune: 1124, afisate in 19 pagini.



ieri 06:01 CITATUL ZILEI