14:01
Comentarii Adauga Comentariu

_ Proiectarea acizilor ribonucleici circulari (circRNAs) pentru o producție îmbunătățită de proteine

_ Ingineria acizilor ribonucleici circulari (circRNAs) ) pentru o producție îmbunătățită de proteine

Acizii ribonucleici circulari (circRNAs) reprezintă o platformă promițătoare pentru studiile expresiei genice ca acid ribonucleic stabil și predominant în celulele eucariote, care apar din back-splicing. Într-un nou raport publicat acum în Nature Biotechnology, Robert Chen și o echipă de cercetători interdisciplinari de la Universitatea Stanford, California, S.U.A., au dezvoltat o abordare sistematică pentru a asambla și testa rapid caracteristicile care afectează producția de proteine ​​pe baza ARN-urilor circulare sintetice. Echipa a maximizat traducerea ARNr-ului prin optimizarea elementelor fine pentru a implementa principiile de proiectare pentru a îmbunătăți randamentul ARN circular de câteva sute de ori. Rezultatele au facilitat o translație crescută a ARN-ului de interes, în comparație cu nivelurile de ARN mesager (ARNm), pentru a oferi o traducere durabilă in vivo.

Dezvoltarea ARN circular (ARNm) în laborator

p> Terapeuticele bazate pe acizi ribonucleici se întind pe ARN mesager (ARNm), ARN-uri mici de interferență (siRNA) și microARN (miARN) cu extindere în medicina modernă, inclusiv molecule mici, substanțe biologice și terapie celulară. De exemplu, vaccinurile ARNm populare recent pot fi proiectate în laborator și dezvoltate într-un ritm rapid pentru a răspunde crizelor medicale urgente și în evoluție. ARN-urile care codifică pot fi circularizate în ARN-uri pentru a prelungi durata translației proteinelor, pe baza moleculelor de ARN care se unesc covalent cap-coadă. Bioinginerii au avansat, de asemenea, sinteza transcrierilor lungi circulare în circRNA. Cu toate acestea, mecanismele fundamentale de inițiere a translației pentru a forma ARN circular sau ARN mesager diferă din cauza lipsei unui capac de 7-metilguanilat (M7G) pe ARN-urile circulare. Ca urmare a acestui fapt, cercetătorii trebuie să examineze temeinic principiile traducerii circulare a ARN-ului pentru a construi terapii mai bune și, eventual, a depăși capacitățile de translație ale ARNm. Pentru a examina acest aspect, echipa a dezvoltat o platformă modulară de mare debit pentru a construi și testa ARN-uri circulare sintetice pentru traducere optimizată și randamente îmbunătățite de proteine.

Oamenii de știință au dezvoltat o platformă de clonare modulară formată dintr-un set de părți compatibile cu clonarea Golden Gate și Gibson pentru a permite testarea cu randament mai mare a circRNA. Folosind platforma, ei au determinat modul în care aspectele specifice ale designului ARN circular au afectat traducerea acestuia. De exemplu, echipa a arătat anterior cum răspunsurile imune declanșate de ARN circular pot fi evitate in vivo prin modificarea moleculelor cu m6A. Cu toate acestea, cercetătorii trebuie să înțeleagă în continuare impactul acestui pas asupra traducerii circulare a ARN-ului. Pentru a rezolva acest lucru, Chen și echipa și-au folosit platforma de clonare și au încorporat m6A. În comparație cu ARN-urile nemodificate, cele care conțin 5% m6A au prezentat o translație egală după transfecție sau electroporare in vitro. Astfel, oamenii de știință au evaluat experimental impactul modificării asupra stabilității circulare a ARN-ului.

Descoperirea dinamicii circRNA pentru rezultate puternice de traducere

Pentru a descoperi principiile care stau la baza topologiei vectorului circRNA necesare pentru o traducere puternică, cercetătorii au început să sintetizeze circRNA-uri pentru a genera variante cu peptide codificate de proces. Pe baza rezultatelor, echipa a arătat că creșterea lungimii distanțierului nu a fost benefică pentru traducere. Apoi, au arătat cum regiunile netraduse 5’ și 3’ ar putea îmbunătăți traducerea circARN. Cercetătorii au efectuat, de asemenea, o serie de experimente pentru a examina optimizarea circRNA și apoi le-au comparat într-un singur experiment. Ei au arătat cum modificările au crescut progresiv expresia circARN fără a compromite randamentul de ARN sau eficiența circularizării. Ei au arătat, de asemenea, modul în care cinetica translației ARNm și ARNm diferă semnificativ, unde ARNm-ului a durat mai mult de 24 de ore pentru a atinge lungimea maximă a translației, depășind cu mult durata de traducere a ARNm. Apoi au combinat seria de optimizări ale circARN pentru a testa expresia lor in vivo. Pentru a furniza ARN-urile, echipa le-a formulat cu transportatori care alterează sarcina (CART) sau molecule cationice care mediază expresia ARNm la modelele de șoarece. Rezultatele au arătat modul în care circRNA-urile proiectate ar putea fi exprimate la puteri similare cu ARN-urile modificate in vivo, deși cu o durată mai mare.

Perspectivă

În acest fel, Robert Chen și colegii săi au arătat cum ARN-ul circularizarea are un mare potențial de a transforma medicamentele pe bază de ARN prin extinderea durabilității moleculelor relativ extrem de tranzitorii. Având în vedere diferențele fundamentale dintre mecanismele de traducere a ARNm și circRNA, cunoștințele existente privind maximizarea traducerii ARNm nu s-au tradus neapărat în circARN. Pentru a facilita acest studiu, echipa a creat o platformă de clonare modulară circRNA pentru a testa numeroase variații de secvență și optimizări ale mai multor parametri. Folosind platforma, ei au identificat mai multe abordări pentru a îmbunătăți traducerea proteinelor din circRNA, cu aplicații pentru a proiecta ARN-uri în general, pentru a produce mai multe proteine ​​decât ARNm in vitro și pentru a prezenta o durabilitate mai mare a traducerii sale in vivo și in vitro. Oamenii de știință au disecat în mod sistematic elementele care reglează traducerea circARN pentru a optimiza apoi regiunile de interes pentru randamente crescute de proteine ​​​​circRNA pentru producția durabilă de proteine ​​in vivo.

© 2022 Science X Network


(Fluierul)


Linkul direct catre Petitie

CEREM NATIONALIZAREA TUTUROR RESURSELOR NATURALE ALE ROMANIEI ! - Initiativa Legislativa care are nevoie de 500.000 de semnaturi - Semneaza si tu !

Comentarii:


Adauga Comentariu



Citiți și cele mai căutate articole de pe Fluierul:

Bolsevismul din SUA. Schimb de supraveghere: SanFrancisco permite poliției să monitorizeze în direct camerele private de securitate...Repetam: în direct camerele private de securitate

SUA. Peter Doocy o împiedică pe Karine Jean-Pierre cu o întrebare despre prețurile gazelor sub Joe Biden (VIDEO)

LIBAN. Deponenții conduc băncile libaneze peste limitele de retragere...

Vine urgia...Cea mai mare pană de curent din istorie: 140 de MILIoane din Bangladesh s-au scufundat în întuneric...

California...Case nelocuite, aligatori alergând...

Lipsa asistenței medicale declanșează un război de licitații, în timp ce țările luptă pentru talent...Credeti ca la noi e mai bine?

_ REFAC! �n doar 2 zile, New York Times Hit Piese despre o �țintă a teoriei conspirației� devine �ADEVĂR�

SAH Mare maestru de șah din SUA, în vârstă de 19 ani, acuzat că a folosit margele anale „probabil că a înșelat” de peste 100 de ori online

CIULACU, CIUCA, IOHANNIS, DANCU, GRINDEANU si compania au ingropat ROMANIA. COMENTARIU Lelia Munteanu: Cu cine ne încălzim la iarnă

SUA Cele 10 locuri din Senat cel mai probabil să se răstoarne...

Cel mai mortal uragan din Florida din 1935...

_ FIUL: NE-A AMENINȚAT CĂ NE OMOARA!

SUA. Femeile cu vârsta de 50 de ani și peste ar putea decide alegerile de la mijlocul mandatului...

Butoiul de pulbere Asia...

_ Xavi revoltat că a arbitrat „nedreptatea” în înfrângerea lui Inter

_ SAMANTHA BRICK: De ce nu pot oamenii să înțeleagă durerea mea pentru copiii pe care nu i-am avut niciodată?

_ Bella Hadid își arată abdomenul incredibil de tonifiat la petrecerea aftershow Miu Miu pentru Săptămâna Modei de la Paris

_ Cumpără The Walking Dead...

_ Echipa lui Victorious Coleen o acuză pe Rebekah Vardy că „predica despre bani”

Trump adresează cererea lui Clarence Thomas...

_ HENRY DEEDES: Un început de furtună, umflarea Suella atinge punctele dulci ale Tory

_ Parlamentul Rusiei finalizează procedura de anexare a regiunilor ucrainene

_ Perfect Brugge a învins Atletico în timp ce Griezmann a lovit penalty

_ Poliția a lansat o anchetă pentru crimă după ce un bărbat de 51 de ani găsit rănit într-un parc a murit

_ Kane, Fiul fără dinți, în timp ce Spurs a ținut la egalitate fără goluri la Frankfurt

_ AFL WAG Brittany Bown își dezvăluie grădinița ei uluitoare

_ Noul sondaj arată o mare evoluție pentru Challenger-ul democrat al lui Boebert, lăsând-o vulnerabilă la pierderea cursei

_ Secretele stilului italian pe care le-am putea folosi cu toții pentru a arăta fără efort șic și împreuna

_ Japan Open: iubita lui Nick Kyrgios, Costeen Hatzi, poartă bijuterii în valoare de 40.000 de dolari

Postare distribuită despre venirea „la lumină” cu câteva zile înainte...

TOBE DE RĂZBOI...

Trump apelează la Curtea Supremă pentru lupta despre documentelor confiscate de FBI de la Mar-A-Lago

_ Reboot-ul Frasier a fost preluat de Paramount+ și îl va prezenta pe Kelsey Grammer reluând rolul său

_ Lupta lui Conor Benn împotriva lui Chris Eubank Jr este o lovitură liberă sau a mușcat mai mult decât poate mesteca?

_ Lupii se vor îndrepta spre Julen Lopetegui, iar șeful Spaniei urmează să părăsească Sevilla săptămâna aceasta

_ Prețurile record la gaze, problemele de energie electrică arată o agravare a vulnerabilităților energetice...

_ Kourtney Kardashian și Travis Barker nu locuiesc în aceeași casă, încă se culcă cu fiica, 10 ani

_ BradyBündchen aduce avocați de divorț...

_ Coreea de Sud, SUA, trage rachete ca răspuns la testul din Coreea de Nord

_ Rezumat Liga Campionilor: Clubul Bruges îl uimește pe Atletico Madrid în timp ce Bayern Munchen o învinge pe Viktoria Plzen

_ „Printre singura presă din lume care face asta, serios” – Biden zâmbește în timp ce presa este dat afară de la reuniunea grupului său de lucru pentru avort (VIDEO)

_ Aaron Judge atinge numărul 62 în Bronx! Superstarul Yankees îl depășește pe Roger Maris

_ Ally McCoist susține că tacticile lui Antonio Conte nu obțin tot ce este mai bun din vedetele lui Tottenham

_ Constance Wu iese în evidență într-o rochie mini roșie în timp ce își promovează memoriile Making A Sceneally hărțuit

_ Eintracht Frankfurt - Tottenham 0-0: Spurs sunt ținuți în timp ce Harry Kane și Son Heung-Min ratează șanse mari

_ Vanessa Hudgens pare pregătită să se antreneze în crop top dezvăluit și pantaloni de yoga asortați de la Fabletics

_ Armata lui Putin fuge speriată, deoarece hărțile arată un avans uriaș al Ucrainei în doar câteva ore...

_ Vanessa Hudgens pare pregătită să se antreneze în crop top dezvăluit și pantaloni de yoga asortați de la Fabletics

_ EL NU ESTE QWITTER!

_ Conor Coady se pregătește să rămână la Everton, în ciuda schimbării managerului de la Wolves

_ Warren Gatland, antrenorul principal al Lions de trei ori, va fi expert TV pentru Autumn Nations Series din Anglia

_ G-Flip îl trântește pe troll care l-a întrebat „Ești bărbat?” după prestația AFL Grand Final

_ DOMINIC KING: Atacantul Liverpool Darwin Nunez dorește să facă un punct după un start lent

_ Pep Guardiola este de acord că Phil Foden va deveni în cele din urmă mijlocaș central pentru Manchester City

_ Liverpool 2-0 Rangers: Trent Alexander-Arnold înscrie o lovitură liberă UIMINOARE într-o victorie impresionantă

_ Nu este vina MEA că mini-bugetul a fost dezamăgit, ci din cauza FUNERARIALEI Reginei, spune Kwarteng

_ „Nu mă uit!” Ant Middleton lovește la SAS: Who Dares Wins

_ DEPECHE MODE, Still Mourning, Return With Tour și nou album...

_ Artiștii de tatuaj australieni dezvăluie cine face față mai bine durerii bărbaților și femeilor

_ Trent Alexander-Arnold lovește criticii după ce lovitura sa liberă a ajutat Liverpool să-l învingă pe Rangers 2-0


Pag.1 Pag.2 Pag.3 Pag.4 Pag.5 Pag.6 Pag.7
Pag.8 Pag.9 Pag.10 Pag.11 Pag.12 Pag.13 Pag.14 Pag.15

Nr. de articole la aceasta sectiune: 860, afisate in 15 pagini.