20:17 2022-05-16
science - citeste alte articole pe aceeasi tema
Comentarii Adauga Comentariu
_ CRISPR acum posibil la gandaci
_ CRISPR acum posibil în gândaci
Cercetătorii au dezvoltat o abordare CRISPR-Cas9 pentru a permite editarea genelor la gândaci, potrivit unui studiu publicat de Cell Press pe 16 mai în jurnalul Cell Reports Methods. Tehnica simplă și eficientă, denumită CRISPR „parental direct” (DIPA-CRISPR), implică injectarea de materiale în femelele adulte, unde se dezvoltă ouăle, mai degrabă decât în embrionii înșiși.
„Într-un fel, insectă. cercetătorii au fost eliberați de enervarea injecțiilor cu ouă”, spune autorul principal al studiului, Takaaki Daimon, de la Universitatea Kyoto. „Acum putem edita genomurile de insecte mai liber și după bunul plac. În principiu, această metodă ar trebui să funcționeze pentru mai mult de 90% dintre speciile de insecte.”
Abordările actuale pentru editarea genelor de insecte necesită, de obicei, microinjectarea materialelor la începutul anului. embrioni, limitând sever aplicarea sa la multe specii. De exemplu, studiile anterioare nu au realizat manipularea genetică a gândacilor din cauza sistemului lor de reproducere unic. În plus, editarea genelor de insecte necesită adesea echipamente scumpe, o configurație experimentală specifică pentru fiecare specie și personal de laborator cu înaltă calificare. „Aceste probleme cu metodele convenționale i-au afectat pe cercetătorii care doresc să efectueze editarea genomului pe o mare varietate de specii de insecte”, spune Daimon.
Pentru a depăși aceste limitări, Daimon și colaboratorii săi au injectat ribonucleoproteine Cas9 (RNP) în cavitatea principală a corpului de gândaci de sex feminin adult pentru a introduce mutații ereditare în celulele ouă în curs de dezvoltare. Rezultatele au demonstrat că eficiența editării genelor - proporția de indivizi editați din numărul total de indivizi eclozați - ar putea ajunge până la 22%. La gândacul roșu de făină, DIPA-CRISPR a atins o eficiență de peste 50%. Mai mult, cercetătorii au generat gândaci knockin genetic prin co-injectarea de oligonucleotide monocatenar și RNP Cas9, dar eficiența este scăzută și ar trebui îmbunătățită în continuare.
Aplicarea cu succes a DIPA-CRISPR la două specii îndepărtate evolutiv. își demonstrează potențialul de utilizare pe scară largă. Dar abordarea nu este direct aplicabilă tuturor speciilor de insecte, inclusiv muștelor de fructe. În plus, experimentele au arătat că cel mai critic parametru pentru succes este stadiul femelelor adulte injectate. Drept urmare, DIPA-CRISPR necesită cunoștințe bune despre dezvoltarea ovarelor. Acest lucru poate fi o provocare pentru unele specii, având în vedere diversele istorii de viață și strategiile de reproducere ale insectelor.
În ciuda acestor limitări, DIPA-CRISPR este accesibil, extrem de practic și ar putea fi implementat cu ușurință în laboratoare, extinzând aplicația. de editare a genelor la o mare diversitate de specii de insecte model și non-model. Tehnica necesită un echipament minim pentru injectarea la adulți și doar două componente - proteina Cas9 și ARN cu un singur ghid - simplificând foarte mult procedurile de editare a genelor. În plus, disponibil în comerț, standardul Cas9 poate fi utilizat pentru injectarea adulților, eliminând necesitatea unei inginerie personalizată consumatoare de timp a proteinei.
„Prin îmbunătățirea metodei DIPA-CRISPR și făcând-o și mai eficientă și mai versatilă. , este posibil să putem permite editarea genomului în aproape toate cele peste 1,5 milioane de specii de insecte, deschizând un viitor în care putem utiliza pe deplin funcțiile biologice uimitoare ale insectelor”, spune Daimon. „În principiu, ar putea fi, de asemenea, posibil ca și alte artropode să poată fi modificate genomului folosind o abordare similară. Acestea includ dăunători agricoli și medicali, cum ar fi acarienii și căpușele, și resursele piscicole importante, cum ar fi creveții și crabii.”
Comentarii:
Adauga Comentariu