23:56
Comentarii Adauga Comentariu

Cercetătorii dezvăluie structura 3D responsabilă pentru expresia genelor

Complex de preinițiere a transcripției

De la Wikipedia, enciclopedia liberă
Salt la navigareSalt la căutare
Clusterul de ovale care reprezintă complexul de preinițiere a transcripției este blocat în interiorul unui fir curbat de ADN, între regiunea promotor la un capăt și regiunea amplificator la celălalt.
Complexul de preinițiere a transcripției, reprezentat de grupul central de proteine, determină ca ARN polimeraza să se lege de situsul ADN țintă. PIC este capabil să lege atât secvența promotor lângă gena care urmează să fie transcrisă, cât și o secvență amplificator într-o parte diferită a genomului, permițând secvențelor amplificatoare să regleze o genă îndepărtată de aceasta.

Complexul de preinițiere (abreviat PIC ) este un complex de aproximativ 100 de proteine care este necesar pentru transcrierea genelor care codifică proteinele în eucariote și arhee . Complexul de preinițiere poziționează ARN polimeraza II la locurile de pornire a transcripției genelor denaturează ADN - ul și poziționează ADN-ul în situsul activ al ARN polimerazei II pentru transcripție. [1] [2] [3] [4]

PIC minim include ARN polimeraza II și șase factori generali de transcripție : TFIIA , TFIIB , TFIID , TFIIE , TFIIF și TFIIH . Complexe de reglare suplimentare (cum ar fi coactivatorul mediator [5] și complexele de remodelare a cromatinei ) pot fi, de asemenea, componente ale PIC.


Inițierea replicării ADN-ului

O viziune clasică a formării PIC la promotor implică următorii pași:

  • Proteina de legare TATA (TBP, o subunitate a TFIID) leagă promotorul , creând o îndoire ascuțită în ADN-ul promotorului.
    • Animalele au unii factori legați de TBP (TRF; TBPL1 / TBPL2 ). Ele pot înlocui TBP în anumite contexte speciale. [6]
  • TBP recrutează promotorul TFIIA, apoi TFIIB.
  • TFIIB recrutează ARN polimeraza II și TFIIF promotorului.
  • TFIIE se alătură complexului în creștere și recrutează TFIIH care are activitate protein kinază (fosforilează ARN polimeraza II în cadrul CTD) și activitate ADN helicază (desfășoară ADN-ul la promotor). De asemenea, recrutează proteine ​​de reparare a exciziei nucleotidice.
  • Subunitățile din TFIIH care au activitate ATPază și helicază creează tensiune superhelicală negativă în ADN.
  • Tensiunea superhelicală negativă face ca aproximativ o rotație de ADN să se desfacă și să formeze bula de transcripție .
  • Cablul șablon al bulei de transcripție se angajează cu situsul activ ARN polimerază II.
  • Începe sinteza ARN.
  • După sinteza a ~ 10 nucleotide de ARN și o fază obligatorie a mai multor cicluri de transcripție abortive, ARN polimeraza II scapă de regiunea promotorului pentru a transcrie restul genei.

O ipoteză alternativă a ansamblului PIC postulează recrutarea unei " holoenzime ARN polimerază II " pre-asamblată direct către promotor (compusă din toate, sau aproape toate GTF-urile și ARN polimeraza II și complexe de reglare), într-un mod similar cu ARN-ul bacterian polimeraza (RNAP).

Alte complexe de preinițiere editați ]

Archaea are un complex de preinițiere asemănător cu cel al unui PIC Pol II minimizat, cu un TBP și un factor de transcripție Archaeal B (TFB, un omolog TFIIB). Ansamblul urmează o secvență similară, începând cu legarea TBP la promotor. Un aspect interesant este că întregul complex este legat într-o orientare inversă comparativ cu cele găsite în PIC eucariotă. [7] De asemenea, utilizează TFE, un omolog TFIIE, care ajută la inițierea transcrierii, dar nu este necesar. [8] [9]


Inițierea Pol I începe cu UBTF (UBF) recunoscând un element de control în amonte (UCE) situat în jur de ~ 100 până la 200 bp în amonte. Recrutează factorul selectiv 1 (TIF-IB), care este un complex de TBP și trei unități de factor asociat TBP . UBF recunoaște apoi elementele de control de bază. RRN3 fosforilat (TIF-IB) leagă Pol I. Întregul complex recunoaște UBF / SL1, se leagă de acesta și începe transcrierea. Utilizarea precisă a subunităților diferă între organisme. [10]

Pol III are trei clase de inițiere, care încep cu factori diferiți, recunoscând diferite elemente de control, dar toate convergând către TFIIIB (similar cu TFIIB-TBP; constă din TBP / TRF, un factor legat de TFIIB și o unitate B ″ ) care recrutează Pol III complex de preinițiereArhitectura generală seamănă cu cea a lui Pol II. Doar TFIIIB trebuie să rămână atașat în timpul alungirii. [11]



Pentru prima dată, o echipă de cercetare condusă de Universitatea Northwestern a privit în interiorul unei celule umane pentru a vizualiza o mașină cu mai multe subunități responsabilă de reglarea expresiei genelor.

Numit complexul de pre-inițiere legat de mediator (Med-PIC), structura este un jucător cheie în determinarea genelor care sunt activate și care sunt suprimate. Mediator ajută la poziționarea restului complexului - ARN polimeraza II și a factorilor generali de transcripție - la începutul genelor pe care celula dorește să le transcrie.

Cercetătorii au vizualizat complexul la rezoluție înaltă folosind microscopia electronică criogenică (crio-EM), permițându-le să înțeleagă mai bine cum funcționează. Deoarece acest complex joacă un rol în multe boli, inclusiv în cancer,  , HIV și  , noile înțelegeri ale cercetătorilor asupra structurii sale ar putea fi potențial folosite pentru tratarea bolilor.

„Această mașină este atât de fundamentală pentru fiecare ramură a biologiei moleculare moderne în contextul  ”, a declarat Yuan He din Northwestern, autor principal al studiului. „Vizualizarea structurii în 3D ne va ajuta să răspundem la întrebări biologice de bază, cum ar fi modul în care ADN-ul este copiat în ARN.”

„Văzând această structură ne permite să înțelegem cum funcționează”, a adăugat Ryan Abdella, co-primul autor al lucrării. "Este ca și cum ați dezlipi un aparat de uz casnic obișnuit pentru a vedea cum se potrivește totul. Acum putem înțelege modul în care proteinele din complex se reunesc pentru a-și îndeplini funcția."

Studiul va fi publicat pe 11 martie în revista Science . Aceasta marchează pentru prima dată când complexul Mediator uman a fost vizualizat în 3D în  .

Este profesor asistent de bioștiințe moleculare la Colegiul de Arte și Științe Weinberg din nord-vest. Abdella și Anna Talyzina, ambii studenți absolvenți în laboratorul He, sunt co-primii autori ai lucrării.

Celebrul biochimist Roger Kornberg a descoperit complexul Mediator în drojdie în 1990, proiect pentru care a câștigat Premiul Nobel pentru chimie în 2006. Dar Mediator cuprinde 26 de subunități descurajante - 56 în total atunci când este combinat cu complexul de pre-inițiere - cercetătorii au luat până acum să obțină imagini de înaltă rezoluție ale versiunii umane.

„Este un proiect din punct de vedere tehnic destul de provocator”, a spus el. Aceste complexe sunt rare. Este nevoie de sute de litri de celule umane, care sunt foarte greu de crescut, pentru a obține cantități mici de complexe proteice.

O descoperire a venit când echipa lui He a pus proba pe un singur strat de oxid de grafen. Oferind acest suport, foaia de grafen a minimizat cantitatea de probă necesară pentru imagistică. Și în comparație cu suportul tipic utilizat - carbon amorf - grafenul a îmbunătățit raportul semnal-zgomot pentru imagini cu rezoluție mai mare.

După pregătirea probei, echipa a folosit crio-EM, o tehnică relativ nouă care a câștigat Premiul Nobel pentru chimie din 2017, pentru a determina forma 3D a proteinelor, care sunt adesea de mii de ori mai mici decât lățimea unui fir de păr uman. Tehnica funcționează prin sablarea unui flux de electroni la o probă înghețată rapid pentru a realiza multe imagini 2D.

Pentru acest studiu, echipa lui He a capturat sute de mii de imagini ale complexului Med-PIC. Apoi au folosit metode de calcul pentru a reconstrui o imagine 3D.

„Rezolvarea acestui complex a fost ca și cum ar fi asamblarea unui puzzle”, a spus Talyzina. "Unele dintre aceste subunități erau deja cunoscute din alte experimente, dar nu aveam idee cum piesele s-au asamblat sau au interacționat între ele. Cu structura noastră finală, am putut în cele din urmă să vedem tot acest complex și să înțelegem organizarea acestuia".

Imaginea rezultată arată complexul Med-PIC ca o structură plană, alungită, cu o lungime de 45 nanometri. Cercetătorii au fost, de asemenea, surprinși să descopere că Mediatorul se mișcă față de restul complexului, legându-se de ARN polimeraza II într-un punct de articulație.

„Mediatorul se mișcă ca un pendul”, a spus Abdella. In continuare, vrem sa intelegem ce inseamna aceasta flexibilitate. Credem ca ar putea avea un impact asupra activitatii unei enzime cheie din complex.

 « Text simpluVerifică ortografiaSchimbă limba Reia editarea
 

Mediator (coactivator)

De la Wikipedia, enciclopedia liberă
Salt la navigareSalt la căutare
Diagrama mediatorului cu modul kinază dependentă de ciclină

Mediator este un complex multiproteic care funcționează ca un coactivator transcripțional în toate eucariotele . A fost descoperit în 1990 în laboratorul lui Roger D. Kornberg , laureat al Premiului Nobel pentru chimie din 2006 [1] [2] Complexele mediator [a] interacționează cu factorii de transcripție și ARN polimeraza II . Funcția principală a complexelor mediator este de a transmite semnale de la factorii de transcripție la polimerază. [3]

Complexele mediatorului sunt variabile la nivel evolutiv, compozițional și conformațional. [3] Prima imagine arată doar un „instantaneu” din ce ar putea fi compus un anumit complex mediator, [b], dar cu siguranță nu descrie cu exactitate conformația complexului in vivo . În timpul evoluției, mediatorul a devenit mai complex. Se crede că drojdia Saccharomyces cerevisiae (un eucariot simplu ) are până la 21 de subunități în mediatorul central (exclusiv modulul CDK), în timp ce mamiferele au până la 26.

Subunitățile individuale pot fi absente sau înlocuite cu alte subunități în condiții diferite. De asemenea, există multe regiuni intrinsec dezordonate în proteinele mediator, care pot contribui la flexibilitatea conformațională observată atât cu, cât și fără alte proteine ​​legate sau complexe de proteine. Un model mai realist al unui complex mediator fără modulul CDK este prezentat în a doua figură. [4]

Complexul mediator este necesar pentru transcrierea cu succes de către ARN polimeraza II. Sa demonstrat că mediatorul face contacte cu polimeraza în complexul de preinițiere a transcripției . [3] Un model recent care arată asocierea polimerazei cu mediator în absența ADN este prezentat în figura din stânga. [4] Pe lângă ARN polimeraza II, mediatorul trebuie să se asocieze și cu factorii de transcripție și ADN. Un model al acestor interacțiuni este prezentat în figura din dreapta. [5] Rețineți că diferitele morfologii ale mediatorului nu înseamnă neapărat că unul dintre modele este corect; mai degrabă aceste diferențe pot reflecta flexibilitatea mediatorului, deoarece acesta interacționează cu alte molecule.[c] De exemplu, după legarea amplificatorului și a promotorului de bază, complexul mediator suferă o modificare compozițională în caremodulul kinazei se disocieză de complex pentru a permite asocierea cu ARN polimeraza II și activarea transcripțională. [6]

Complexul Mediator este situat în nucleul celular . Este necesar pentru transcrierea cu succes a aproape tuturor promotorilor genei de clasa II din drojdie. [7] Funcționează în același mod la mamifere. Funcțiile de mediator ca coactivator și se leagă la domeniul C-terminal de a polimerazei II ARN holoenzimă , care acționează ca o punte între această enzimă și factori de transcripție . [8]

Structură editați ]

Arhitectură complexă a mediatorului, cu accent pe „spline” dezordonate din Med 14 [9]

Complexul mediator de drojdie este aproximativ la fel de masiv ca o mică subunitate a unui ribozom eucariot . Mediatorul de drojdie este compus din 25 de subunități, în timp ce complexele de mediator de mamifere sunt puțin mai mari. [3] Mediatorul poate fi împărțit în 4 părți principale: capul, mijlocul, coada și modulul kinazei CDK8 asociat temporar. [10]

Subunitățile mediatorului au multe regiuni intrinsec dezordonate numite „spline”, care pot fi importante pentru a permite schimbările structurale ale mediatorului care schimbă funcția complexului. [3] [d] Figura arată modul în care splinele subunității Med 14 conectează o porțiune mare a complexului, permițând totodată flexibilitate. [4] [e]

Au fost găsite sau produse complexe de mediatori cărora le lipsește o subunitate. Acești mediatori mai mici pot funcționa în mod normal în anumite activități, dar nu au alte capacități. [3] Aceasta indică o funcție oarecum independentă a unora dintre subunități în timp ce face parte din complexul mai mare.

Un alt exemplu de variabilitate structurală este văzut la vertebrate, în care 3 paraloguri ale subunităților modulului kinazei dependente de ciclină au evoluat prin 3 evenimente de duplicare a genei independente , urmate de divergența secvenței. [3]

Model structural mediator [9]

Există un raport potrivit căruia mediatorul formează asociații stabile cu un anumit tip de ARN necodificator , ncARN-a. [11] [f] S-a demonstrat că aceste asociații stabile reglează expresia genelor in vivo și sunt prevenite de mutații în MED12 care produc sindromul FG al bolii umane [11] Astfel, structura unui complex mediator poate fi mărită atât de ARN, cât și de factori de transcripție proteinacee. [3]

Funcție editați ]

Model structural al cozii și mijlocului mediatorului legat de ARN polimeraza II [9]

Mediatorul a fost descoperit inițial, deoarece era important pentru funcția ARN polimerazei II, dar are mult mai multe funcții decât doar interacțiunile la locul de început al transcrierii. [3]

ARN polimeraza II-Complexul de inițiere a nucleului mediatorului editați ]

Mediatorul este o componentă crucială pentru inițierea transcrierii. Mediatorul interacționează cu complexul de pre-inițiere, compus din ARN polimerază II și factori generali de transcriere TFIIB, TFIID, TFIIE, TFIIF și TFIIH pentru a stabiliza și iniția transcrierea. [12] Studiile contactelor Mediator-ARN Pol II în drojdie în devenire au subliniat importanța contactelor TFIIB-Mediator în formarea complexului. S-au arătat interacțiunile Mediatorului cu TFIID în complexul de inițiere. [10]

Structura unui mediator de bază (cMed) asociat cu un complex de pre-inițiere a fost elucidată. [12]

Sinteza ARN editați ]

Complexul de preinițiere, care conține mediator, factori de transcripție, un nucleozom [13] [14] [g] și ARN polimerază II, este important pentru a poziționa polimeraza pentru începutul transcripției. Înainte ca sinteza ARN să poată avea loc, polimeraza trebuie să se disocieze de mediator. Acest lucru pare a fi realizat prin fosforilarea unei părți a polimerazei de către o kinază. Important, factorii de mediator și transcripție nu se disociază de ADN în momentul în care polimeraza începe transcrierea. Mai degrabă, complexul rămâne la promotor pentru a recruta o altă ARN polimerază pentru a începe o altă rundă de transcripție. [3] [h]

Există unele dovezi care sugerează că mediatorul dintr- o drojdie este implicat în reglarea transcrierilor ARN polimerazei III (Pol III) ale ARNt [15] În sprijinul acestor dovezi, un raport independent a arătat asocierea specifică a mediatorului cu Pol III în Saccharomyces cerevisiae . [16] Acei autori au raportat, de asemenea, asocieri specifice cu ARN polimeraza I și proteinele implicate în alungirea transcripției și prelucrarea ARN, susținând alte dovezi ale implicării mediatorului în alungire și procesare. [16]

Organizarea cromatinei editați ]

Mediatorul este implicat în „buclarea” cromatinei , care aduce regiuni îndepărtate ale unui cromozom într-o apropiere fizică mai strânsă. [3] ncARN-a menționat mai sus [11] este implicat în astfel de bucle. [i] ARN-urile potențatoare (eARN) pot funcționa similar. [3]

În plus față de ciclul euchromatinei , mediatorul pare să fie implicat în formarea sau menținerea heterocromatinei la centromeri și telomeri . [3]

Transducția semnalului editați ]

Semnalizarea TGFβ la nivelul membranei celulare are ca rezultat 2 căi intracelulare diferite . Una dintre ele depinde de MED15, [j] în timp ce cealaltă este independentă de MED15. [17] In ambele celule umane și Caenorhabditis elegans MED15 este implicat in homeostazia lipidelor prin calea care implica SREBPs [18] In modelul de plante Arabidopsis thaliana ortologul este necesar de MED15 pentru semnalizarea de hormon de plante de acid salicilic, [19] în timp ce MED25 este necesară pentru activarea transcripțională a răspunsurilor de semnalizare iasmonat și umbră. [20] [21] [22]Două componente ale modulului CDK (MED12 și MED13) sunt implicate în calea de semnalizare Wnt [3] MED23 este implicată în calea RAS / MAPK / ERK [3] Această recenzie abreviată arată versatilitatea subunităților mediatorului individual și duce la ideea acel mediator este un punct final al căilor de semnalizare. [3]

Boala umană editați ]

Implicarea mediatorului în diferite boli umane a fost revizuită. [23] [24] [25] [26] [27] [28] [29] [30] [31] [32] [33] Deoarece inhibarea unei interacțiuni a unei căi de semnalizare cauzatoare de boală cu o subunitate de mediator poate nu inhibă transcripția generală necesară pentru funcționarea normală, subunitățile mediator sunt candidați atrăgători pentru medicamente terapeutice. [3]

Interacțiuni editați ]

Mediator interactom în Saccharomyces cerevisiae [16]

O metodă care folosește o liză celulară foarte blândă în drojdie, urmată de co- imunoprecipitare cu un anticorp la o subunitate mediator (Med 17), a confirmat aproape toate interacțiunile raportate anterior sau prezise și a relevat multe interacțiuni specifice nebănuite anterior ale diferitelor proteine ​​cu mediator. [16]

MED 1 editați ]

Rețeaua de interacțiune a proteinei MED1 din BioPlex 2.0

O discuție cu privire la toate subunitățile mediatorilor depășește scopul acestui articol, dar detaliile uneia dintre subunități sunt ilustrative pentru tipurile de informații care pot fi colectate pentru alte subunități.

reglementare de către micro ARN-uri editați ]

Micro ARN-urile sunt implicate în reglarea expresiei multor proteine. Med1 este vizat de miR-1, care este important în reglarea genelor în cazurile de cancer. [34] supresoare tumorale miR-137 reglementeaza de asemenea MED1. [35]

Dezvoltarea embrionară a șoarecilor editați ]

Mutanții nul mor la o vârstă gestațională timpurie (ziua embrionară 11.5). [36] [37] Prin investigarea mutanților hipomorfi (care pot supraviețui mai mult de 2 zile), s-a constatat că defectele placentare erau în primul rând letale și că existau și defecte în dezvoltarea cardiacă și hepatică, dar multe alte organe erau normale [37]

Celule și țesuturi de șoarece editați ]

O mutație mediator provoacă dinți păroși la șoareci

Mutațiile condiționale pot fi produse la șoareci care afectează numai celule sau țesuturi specifice la momente specifice, astfel încât șoarecele să se dezvolte până la maturitate și fenotipul adultului poate fi studiat. Într-un caz, sa constatat că MED1 participă la controlul momentului evenimentelor de meioză la șoareci masculi. [38] Mutanții condiționați din keratinocite prezintă diferențe în vindecarea rănilor cutanate. [39] S-a descoperit că un mutant condiționat la șoareci schimbă epiteliul dentar în epiteliu epidermic , ceea ce a determinat creșterea părului asociată cu incisivii. [40]

Compoziția subunității editați ]

Complexul Mediator este compus din cel puțin 31 de subunități din toate eucariotele studiate: MED1 , MED4 , MED6 , MED7 , MED8 , MED9 , MED10 , MED11 , MED12 , MED13 , MED13L, MED14 , MED15 , MED16 , MED17 , MED18 , MED19 , MED20 , MED21 , MED22 , MED23 , MED24 , MED25 , MED26 ,MED27 , MED28 , MED29 , MED30 , MED31 , CCNC și CDK8 . Există trei componente specifice fungilor, denumiți Med2 , Med3 și Med5 . [41]

Cele Subunitățile formează cel puțin trei structural submodules distincte. Capul și modulele de mijloc interacționează direct cu ARN polimeraza II, în timp ce modulul de coadă alungit interacționează cu proteinele de reglare specifice genei Mediator care conține modulul CDK8 este mai puțin activ decât Mediator care nu are acest modul în sprijinirea activării transcripționale .

  • Modulul principal conține: MED6, MED8, MED11, SRB4 / MED17, SRB5 / MED18, ROX3 / MED19, SRB2 / MED20 și SRB6 / MED22.
  • Modulul central conține: MED1, MED4, NUT1 / MED5, MED7, CSE2 / MED9, NUT2 / MED10, SRB7 / MED21 și SOH1 / MED31. CSE2 / MED9 interacționează direct cu MED4.
  • Modulul de coadă conține: MED2, PGD1 / MED3, RGR1 / MED14, GAL11 / MED15 și SIN4 / MED16.
  • Modulul CDK8 conține: MED12, MED13, CCNC și CDK8. Pregătirile individuale ale complexului Mediator lipsit de una sau mai multe subunități distincte au fost denumite diferit ARC, CRSP, DRIP, PC2, SMCC și TRAP.

La alte specii modifica ]

Mai jos este o comparație între specii de subunități complexe mediator. [41] [42]

Subunitatea Nr.Gena umanăGena C. elegansD. gena melanogasterGena S. cerevisiaeSch. gena pombe
MED1MED1Sop3 / mdt-1.1, 1.2MED1MED1med1
Med2 [k]MED2
Med3 [k]PGD1
MED4MED4MED4MED4med4
Med5 [k]NUT1
MED6MED6MDT-6MED6MED6med6
MED7MED7MDT-7 / let-49MED7MED7med7
MED8MED8MDT-8MED8MED8med8
MED9MED9MED9CSE2
MED10MED10MDT-10NUT2med10
MED11MED11MDT-11MED11MED11med11
MED12MED12MDT-12 / dpy-22MED12SRB8srb8
MED12LMED12L
MED13MED13MDT-13 / let-19MED13SSN2srb9
MED14MED14MDT-14 / rgr-1MED14RGR1med14
MED15MED15mdt-15MED15GAL11YN91_SCHPO [l]
MED16MED16MED16SIN4
MED17MED17MDT-17MED17SRB4med17
MED18MED18MDT-18MED18SRB5med18
MED19MED19MDT-19MED19ROX3 [41]med19
MED20MED20MDT-20MED20SRB2med20
MED21MED21MDT-21MED21SRB7med21
MED22MED22MDT-22MED22SRB6med22
MED23MED23MDT-23 / sur-2MED23
MED24MED24MED24
MED25MED25MED25
MED26MED26MED26
MED27MED27MED27med27
MED28MED28MED28
MED29MED29MDT-19MED29
MED30MED30MED30
MED31MED31MDT-31MED31SOH1med31
CCNCCCNCcic-1CycCSSN8pch1
CDK8CDK8cdk-8Cdk8SSN3srb10
 

(Fluierul)


Linkul direct catre Petitie

CEREM NATIONALIZAREA TUTUROR RESURSELOR NATURALE ALE ROMANIEI ! - Initiativa Legislativa care are nevoie de 500.000 de semnaturi - Semneaza si tu !

Comentarii:


Adauga Comentariu



Citiți și cele mai căutate articole de pe Fluierul:

Medic acuză: În fazele inițiale, te faci bine în 24 de ore cu o singură perfuzie. România refuză să cumpere tratamentul. În faze mai grave există tratament cu un înalt grad de eficiență:Tocilizumab. România nu-l cumpără. Opinia Fluierul.ro

Vâlcov acuză că Iohannis că ar fi avut înțelegeri cu CEO al OMV pe legea offshore în urma unor întâlniri repetate şi a retrimiterii legii offshore în parlament. Cine investighează posibila trădare de țară? NIMENI.

STRĂINILOR NU LE PLAC PRODUSELE ROMÂNEȘTI. Asociaţia Marilor Reţele Comerciale din România şi Confederaţia Patronală CONCORDIA au cerut Parlamentului să respingă Legea nr. 321/2009 care obligă hipermarketurile să achiziţioneze 51% produse românești la raft

Geanina Lungu, principala prezentatoare de știri de la RTV, demisionează după șase ani

Ana Maria Mocanu, GOALĂ la duş. Imagini de infarct FOTO XXX

Aşa convingi o femeie matură să facă amor cu un bărbat tânăr

COMENTARIU Valeriu ȘUHAN: Operation "Sentinel"

ASIA EXPRESS, imagini pentru adulţi: Vârciu a dezbrăcat-o pe Daniela Crudu. LIVE VIDEO A1

BOMBĂ ActiveNews: "Președintele Klaus Iohannis este membru al Organizației Progresiste 'European Council of Foreign Relations' un Think-Tank fondat de GEORGE SOROS". Fluierul.ro a descoperit că ECFR e condusă de Carl Bildt MEMBRU AL GRUPULUI BILDERBERG

AU REDESCHIS ȘI I-AU INFECTAT. Copiii și profesorii se infectează pe capete. Peste 1.000 de cazuri de COVID-19 in scoli, de la reinceperea cursurilor. Acesta e Numai Vârful Aisbergului Infectărilor Școlare. Copii merg acasă și-și îmbolnăvesc Familiile.


Pag.1
Nr. de articole la aceasta sectiune: 10, afisate in 1 pagina.