13:02 2023-02-01
science - citeste alte articole pe aceeasi tema
Comentarii Adauga Comentariu
_ Utilizarea CRISPR pentru detectarea biomarkerilor de cancer
_ Utilizarea CRISPR pentru detectarea biomarkerilor de cancer
Majoritatea tehnicilor de diagnosticare a cancerului se bazează pe proceduri incomode și invazive, cum ar fi biopsii, endoscopii sau mamografii. Probele de sânge ar putea fi o opțiune mai puțin neplăcută, deși doar câteva forme ale bolii pot fi diagnosticate în acest fel în prezent. Dar acum, cercetătorii care raportează în ACS Sensors au dezvoltat o metodă ușor de utilizat care poate detecta cantități mici de molecule legate de cancer în exozomi din plasmă și poate distinge eficient între probele maligne și cele benigne.
Exozomii sunt mici. vezicule care se prinde dintr-o celulă gazdă, transportând înăuntru încărcătură, cum ar fi acizi nucleici, lipide și proteine. Aceasta înseamnă că oferă o fereastră asupra stării celulei din care provin. În consecință, mediul intracelular unic al celulelor canceroase va fi reflectat în exozomii acestora prin biomarkeri, cum ar fi micro ARN (miARN). Aceștia sunt acizi nucleici foarte mici, de doar câteva nucleotide în lungime, care reglează expresia proteinelor în celule și pot deveni dereglați în tumori. Prin urmare, este posibil ca un test de sânge să poată detecta într-o zi celulele canceroase pur și simplu prin țintirea acestor miARN-uri exosomale.
Dar cuantificarea miARN-urilor a fost dificilă, deoarece aceștia sunt prezenți la niveluri foarte scăzute în exozomi, necesitând procese laborioase care pot introduce contaminare și raportați rezultate nesigure. Deci, unii cercetători au analizat ARN-ul și proteinele din vezicule cu instrumentul de editare genetică CRISPR. Dar Hua Gao, Kaixiang Zhang și colegii săi au vrut să dezvolte o modalitate de a detecta un număr mic de miARN-uri exosomale legate de cancer, folosind un alt sistem CRISPR cu o activitate unică a RNazei, care era sensibilă, fiabilă și eficientă.
Pentru a a creat metoda de detectare, echipa a proiectat un sistem CRISPR/Cas13a pentru a separa o moleculă reporter marcată cu fluorofor și stingere, apoi a împachetat-o într-un lipozom - în esență o versiune fabricată a unui exozom. Când cele două tipuri de compartimente s-au fuzionat împreună, încărcătura CRISPR ar interacționa apoi cu materialul genetic exosomal. Dacă secvența miARN țintă a fost prezentă, proteina Cas13a a fost activată și a tăiat molecula reporter, producând un semnal fluorescent. În aceste experimente, echipa a vizat miRNA-21, care este implicat în dezvoltarea mai multor boli, inclusiv cancerul de sân. Metoda a detectat cu succes acest miARN într-un amestec de secvențe similare cu sensibilitate ridicată. În alte experimente, cercetătorii au testat metoda pe un grup de exozomi din celule umane sănătoase și grupuri derivate din celulele canceroase de sân. Sistemul a diferențiat în mod constant exozomii legați de cancer de cei derivați din celule sănătoase, arătând că ar putea fi util ca diagnostic al cancerului. Cercetătorii spun că această metodă are potențialul de a face diagnosticul și monitorizarea cancerului mai rapid și mai ușor prin analiza probelor de sânge.
Comentarii:
Adauga Comentariu